高效液相色譜儀梯度洗脫曲線
高效液相色譜儀梯度洗脫時,常用一個弱極性溶劑A和一個強極性溶劑B組合,以梯度洗脫時間為橫坐標,以流動相中強極性組分B的體積百分含量為縱坐標,可繪出梯度洗脫曲線。若在單位時間內,強極性溶劑B在流動相中的體積百分含量以恒定速率增加,則流動相的極性呈線性梯度輸出;若不以恒定速度增加,則流動相的極性呈凸形或凹形梯度輸出。
當梯度洗脫方式確定后,對應不同的梯度洗脫形狀獲得色譜圖。
1、若呈線性梯度洗脫,色譜圖中每個譜帶寬度相等,各個譜帶間具有相同的分離度。
2、若呈指數凸形梯度洗脫,在分離開始時,B的體積百分含量增加迅速,使各組分譜帶以較低的平均容量因子k值洗脫,最終譜帶的k值也較低,使開始被洗脫的色譜峰形尖銳,分離度減小。在分離的后期,B的體積百分含量增長減慢,使后被洗脫的色譜峰譜帶加寬,分離度增大。
3、若呈指數凹形梯度洗脫,開始被洗脫的色譜峰譜帶較寬,分離度較好;后洗脫的色譜峰譜帶較尖銳,分離度減小。
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