SDS-PAGE凝膠的制備過(guò)程
聚丙烯酰胺凝膠電泳 (SDS-PAGE)凝膠的制備至關(guān)重要,凝膠制備不均,好好的樣品就給糟蹋了,以下是SDS-PAGE膠凝膠的制備步驟。
如何配制SDS-Page 膠凝膠的制備過(guò)程:
1、 按要求裝配好垂直電泳板,兩塊玻璃板的兩側(cè)及底部用1%的瓊脂 糖封邊,防止封閉不嚴(yán)而使聚丙烯酰胺液漏出。
2、 將裝好的玻璃電泳板傾斜成45~60℃角。
3、 按表3配制所需%濃度凝膠的毫升數(shù)。
4、 加入TEMED后,立即混勻,緩緩倒入兩玻璃板間的膠床中,直到液體接近溢出時(shí)為止。
5、 立即插入適當(dāng)?shù)氖嶙樱芮凶⒁夥乐故猃X下產(chǎn)生氣泡,用一有力的夾將梳子夾在一邊的玻璃板上,然后將玻璃板斜靠在物體上,使成10°角,可減少液體泄漏的機(jī)會(huì)。
6、 室溫聚合一小時(shí)后,將玻璃板插入電泳槽中,上緊,倒入0.1XTBE緩沖液。
7、 小心取出梳子,加樣。
How to Make an SDS-PAGE gel
Alright so here’s a quick video on how to cast an SDS-PAGE gel. Although recipes can vary, the ingredients shown here are almost always used. Remember: always add TEMED last, and pour into plates immediately after!
Already know how to make a gel, but have problems with leaky gels? Check out our other video on How to Avoid a Leaky SDS-PAGE gel.
Okay now that you know how to make it, check out this video on How to Run an SDS-PAGE gel.
注意事項(xiàng):凝膠制備的過(guò)程很簡(jiǎn)單,但是凝膠一定要均勻無(wú)氣泡,取出梳子的時(shí)候一定要小心,放置將膠孔戳破。