食品微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量要求及評價標(biāo)準
食品安全監(jiān)管及檢測是保障人民群眾“舌尖上的安全”的一項重點工作,為了使食品安全檢測工作更好的為食品安全監(jiān)管服務(wù),各項食品安全檢測標(biāo)準都在不斷的清理和改進中.GB/T4789.28-2003《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗染色法、培養(yǎng)基和試劑》只介紹了微生物檢驗中常用的幾種染色法的方法和步驟,同時對培養(yǎng)基和試劑的配制方法和步驟進行了具體的要求,并沒有在培養(yǎng)基的質(zhì)量控制和評判標(biāo)準方面提出系統(tǒng)全面的要求,以致各檢測單位采用的培養(yǎng)基的質(zhì)量控制標(biāo)準不一致.因此,GB/T4789.28一2003的修訂就顯得尤為關(guān)鍵.根據(jù)《中華人民共和國食品安全法》和《食品安全國家標(biāo)準管理辦法》規(guī)定,經(jīng)食品安全國家標(biāo)準審評委員會審查通過2014年6月1日起實施標(biāo)準GB4789.28一2013《食品微生物學(xué)檢驗培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》并代替GB/T4789.28一2003,新的標(biāo)準對食品安全微生物檢測培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量控制及評判標(biāo)準做出了詳細的規(guī)定,為做好食品安全微生物檢測培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量保證和性能測試提供了檢測依據(jù),為保證食品安全微生物檢測把好第一關(guān)打下堅實的基礎(chǔ)
新舊標(biāo)準的差異
2013年12月6日,國家衛(wèi)生和計劃生育委員會發(fā)布了2013年第13號公告,共發(fā)布了75項食品安全國家標(biāo)準.其中涉及食品微生物學(xué)檢驗(GB4789系列)標(biāo)準5個,并定格為食品安全國家標(biāo)準
新發(fā)布實施的GB4789.28-2013與舊版GB/T4789.28-2003相比,具有以下的差異:
修改了標(biāo)準的名稱和年號
新標(biāo)準由以往的推薦性標(biāo)準修改為強制性標(biāo)準(標(biāo)準號從GB/T修改為GB),中文名稱也相應(yīng)的增加了“食品安全國家標(biāo)準”.同時,頒布的單位由原來衛(wèi)生部和國標(biāo)委聯(lián)合頒布,改為由國家衛(wèi)生和計劃生育委員會獨立頒布
刪除了培養(yǎng)基和試制的配方、配制方法和微生物染色法
原標(biāo)準GB/T4789.28-2003中對微生物染色法進行了介紹,并規(guī)定了食品微生物檢測中用到的各種培養(yǎng)基的成分和制備方法.GB4789.28-2013中則去掉了微生物染色法這一部分內(nèi)容,同時也不再強調(diào)各種培養(yǎng)基成分和制備方法的要求
增加了培養(yǎng)基和試制的質(zhì)量控制方法和指標(biāo)
GB4789.28-2013中增加了各種奧型的培養(yǎng)基及試劑的質(zhì)量保證、實驗室制備培養(yǎng)基應(yīng)該注意的問題和實驗室培養(yǎng)基性能測試的方法及判定標(biāo)準.新標(biāo)準對培養(yǎng)基和試削進行了詳細的分類,并對每一類培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量控制進行了詳細的介紹.使相關(guān)技術(shù)人員能清晰的了解食品微生物學(xué)栓驗所用的培養(yǎng)基分類及培養(yǎng)基的質(zhì)量控制和性能測試方法
增加了培養(yǎng)基的不正確配制出現(xiàn)的質(zhì)量問題及原因分析
新標(biāo)準增加了培養(yǎng)基的不正確配制出現(xiàn)的質(zhì)量.問題及原因分析,對于微生物實驗培暴基制備中經(jīng)常遇到的問題如:培養(yǎng)基不能凝固、pH不正確,顏色異常,產(chǎn)生沉淀、培券基出現(xiàn)抑制或低生長率、選擇性差、污染等具體情況進行了原因分析,以便相關(guān)實驗人員在培養(yǎng)基配制中遇到奧似問題時可以對癥下藥的查找和分析問題的原因.為正確制備培養(yǎng)基提供參考依據(jù)和指導(dǎo)
培養(yǎng)基及試劑的質(zhì)量保證
我國的培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家眾多,培養(yǎng)基種類繁多,雖然很多生產(chǎn)廠家和使用者也有自己的質(zhì)量控制標(biāo)準,但是新標(biāo)準GB4789.28-2013沒有發(fā)布實施之前,沒有一個系統(tǒng)全面的國家標(biāo)準控制培養(yǎng)基的質(zhì)量,從而導(dǎo)致各種廠家生產(chǎn)的培養(yǎng)基質(zhì)量參差不齊,對很多微生物學(xué)實驗結(jié)果產(chǎn)生了不同程度的影響.因此,培養(yǎng)基質(zhì)量控制在微生物檢驗中就顯得尤為重要[1-0.培養(yǎng)基質(zhì)量控制方法分為理化試驗方法和微生物學(xué)試驗方法,其中理化試驗方法包括pH值的測定、凝膠強度的測定等,微生物學(xué)試驗方法分為固體和液體培養(yǎng)基的定量和半定量及定性試驗[”.新標(biāo)準GB4789.28-2013中就培養(yǎng)基的質(zhì)量保證從不同的幾個方面做出了相關(guān)的規(guī)定.生產(chǎn)企業(yè)提供的證明性文件和產(chǎn)品的交貨驗收、貯存.培養(yǎng)基的實驗室制備、培養(yǎng)基的使用、培養(yǎng)基的棄置等,這就使培養(yǎng)基的質(zhì)量控制從生產(chǎn)商的產(chǎn)品供應(yīng)到實驗宣制備、產(chǎn)品使用、產(chǎn)品銷毀等各方面和各環(huán)節(jié)過程得到很好的控制,并使培養(yǎng)基的潮源有據(jù)可依
質(zhì)控菌株的保藏及使用
實驗室的測試菌橡不僅是微生物檢驗中的標(biāo)準菌種成參照標(biāo)本,同時也是進行培養(yǎng)基和試劑的性能測試的微生物,因此測試菌株的正確保藏和便用培養(yǎng)基和試劑的性能測試的一個關(guān)鍵環(huán)節(jié).不同菌株的保藏和使用,很大程度上受到保藏方法的影響,因此,應(yīng)該根據(jù)各菌株的特性選擇相應(yīng)的保藏方法.如凍干保藏.利用多孔磁珠在一70C保藏、使用液氮保藏或其他有效的保藏方法等
制備儲存菌株時,應(yīng)注意避免標(biāo)準鍺存藺株的交叉污染和(或)退化,應(yīng)先將標(biāo)準儲存菌株制成菌懸液.再轉(zhuǎn)接到非選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng).從而獲得特性穩(wěn)定的菌株.對于商業(yè)來源的菌株,應(yīng)按照制造商的說明嚴格執(zhí)行.儲存菌株不應(yīng)用來制備標(biāo)準儲存菌株或標(biāo)準菌株
新標(biāo)準附錄B還給實驗人員簡單明了的展示了從標(biāo)準菌株制備標(biāo)準儲備菌株、工作菌株等的工作流程團.為測試菌株的正確保藏和使用提供保證
培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求
微生物學(xué)實驗室的主要工作是對各種微生物進行保存、復(fù)蘇、培養(yǎng)、檢測和(或)計數(shù),所用的培養(yǎng)基應(yīng)該對樣品和被測微生物都具有特異性.因此,微生物檢驗過程要求培養(yǎng)基符合標(biāo)準或者滿足最低性能要求,并保證能夠獲得重現(xiàn)性結(jié)果,這樣才能使分析結(jié)果準確、可靠
原標(biāo)準GB/T4789.28一2003中并未對培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求作出具體的規(guī)定,但是在CNAS-CL09檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領(lǐng)域的應(yīng)用說明中提出了實驗室應(yīng)建立和保持有效的適合試驗范圍的培養(yǎng)基(試劑)質(zhì)量控制程序.該程序應(yīng)該包括對培養(yǎng)基(試劑)進行評估的方式和儲存的規(guī)定、接受/拒收的標(biāo)準等;對自備的和商業(yè)提供的培養(yǎng)基(試劑)都需要評估;根據(jù)培養(yǎng)基(試劑)的性質(zhì)和實驗類型,對培養(yǎng)基(試劑)的可用性進行評估.實驗室應(yīng)該使用符合要求的培養(yǎng)基.對微生物檢測中起關(guān)鍵作用的培養(yǎng)基必須采取技術(shù)性驗收,但是在GB4789.28--2013還未正式發(fā)布實施之前并沒有具體的標(biāo)準方法和依據(jù)對培養(yǎng)基進行有效的質(zhì)量控制和評價.對培養(yǎng)基進行有效的質(zhì)量控制和評價,從而保證實驗室結(jié)果的可靠性和有效性是微生物學(xué)實驗室質(zhì)量控制程序的一個必要組成部分,新標(biāo)準GB4789.28一2013中提出了培養(yǎng)基質(zhì)量控制要求和培養(yǎng)基的性能測試方法,為培養(yǎng)基的性能測定提供了依據(jù),從根本上保證了培養(yǎng)基的質(zhì)量.筆者對新標(biāo)準GB4789.28-2013進行了仔細研讀,該標(biāo)準在培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量要求部分對實驗室使用的商品化和非商品化的培養(yǎng)基均進行詳細的分類,并對每一類培養(yǎng)基和試劑的微生物學(xué)要求和性能測試方法作出了詳細規(guī)定.實驗室使用的培養(yǎng)基的分類、質(zhì)量控制指標(biāo)和方法詳見
表１生產(chǎn)商和實驗室自制的培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量控制的測試方法
表２實驗室使用商品化培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量控制的測試方法
培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量好壞,直接影響到很多微生物學(xué)實驗的結(jié)果,新標(biāo)準GB4789.28-2013中對食品微生物檢測培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量控制作出了.一個系統(tǒng)全面的要求,對控制培養(yǎng)基的質(zhì)量起到了很好的指導(dǎo)作用,使培養(yǎng)基的質(zhì)量控制從生產(chǎn)商的產(chǎn)品供應(yīng)到實驗室制備、產(chǎn)品使用、產(chǎn)品銷毀等各方面和各環(huán)節(jié)過程得到很好的控制,并使培養(yǎng)基的溯源有據(jù)可依.同時,認真學(xué)習(xí),深入理解并嚴格實施該標(biāo)準的要求對提高食品微生物檢測結(jié)果的準確性和可靠性具有很重要的作用
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