用鹽酸胍進(jìn)行干燥膜的變性/復(fù)性循環(huán)
材料與儀器
HEPES結(jié)合緩沖液
步驟
1) 按基本方案步驟1?15進(jìn)行。
2) 將平皿在4℃冷卻10 min。用針扎孔標(biāo)記各膜的位置。小心地揭起膜,室溫下在空氣中瞭干15 min。
3) 將膜浸于HEPES結(jié)合緩沖液/6 mol/L鹽酸狐中,4℃輕輕搖動(dòng)溫育10 min。在新 鮮的HEPES結(jié)合緩沖液/6 mol/L鹽酸胍中重復(fù)1次。
4) 將膜浸于HEPES結(jié)合緩沖液/3 mol/L鹽酸胍(每10張膜50 mL)中,4℃ 5 min。 重復(fù)4次。每次用HEPES緩沖液及濃度較前次減半的鹽酸胍進(jìn)行漂洗。
5) 將膜浸于HEPES緩沖液(50 mL/10張膜)中,4℃ 5 min。用新鮮緩沖液重復(fù)洗1次。
6) 在BLOTTO中溫育封閉。
7) 進(jìn)行濾膜篩選。