纖維素的高碘酸活化實驗
原理
材料與儀器
纖維素粉
NaHCO3-NaIO4 碳酸鈉緩沖液。NaBH4 溶液 乙酸鈉-乙酸 PBS
步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
將 2 g 纖維素懸浮于 40 ml 0.1 mol/L NaHCO3-0.06 mol/L NaIO4 中,黑暗條件下放置 2 h,然后在玻璃料上用 0.1 mol/L pH 9.0 碳酸鈉緩沖液沖洗。在 40 ml 緩沖液中加入待固定的蛋白質(約 1 mg/ml),室溫振蕩過夜。為去除希夫堿,在溶液中加入 2 ml NaBH4,室溫振蕩 30 min。之后再次加入 2 ml NaBH4,室溫振蕩 30 min。用 0.1 mol/L pH 4.0 乙酸鹽-乙酸、PBS 和 0.05% 的吐溫 20 沖洗固體材料。
常見問題
試劑:
0.1 mol/L NaHCO3-0.06 mol/L NaIO4(NaHCO3,Mr=84.0;NaIO4,Mr=213.9;8.4 g NaHCO3 ,12.8 g NaHCO3 溶于 100 ml H2O)
0.1 mol/L 碳酸鈉緩沖液(NaHCO3-Na2C03),pH 9.0
NaBH4 溶液(0.1 g NaBH4 溶于 10 ml 0.1 mol/L NaOH,現配)
0.1 mol/L 乙酸鈉-乙酸,pH 4.0
PBS(磷酸緩沖液:10 mmol/L 磷酸二氫鉀-鈉,pH 7.2,0.8% NaCl,0.02% KCl)
0.05% 吐溫 20 溶于 PBS