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細胞分裂的形態觀察實驗-減數分裂
發布日期:2024-08-22 08:49:42


細胞分裂的形態觀察實驗-減數分裂


原理

減數分裂(Meiosis)是配子發生過程中的一種特殊有絲分裂,即染色體復制一次,而細胞連續分裂兩次,結果使染色體數日減半的過程。減數分裂過程中體現了遺傳三定律,所以說減數分裂在穩定種的遺傳性狀和繁殖中均起著重要作用。

材料與儀器

蝗蟲
Carnoy固定液 乙醇 醋酸洋紅染液 醋酸 二甲苯
顯微鏡 擦鏡紙 解剖針 眼科鑷子 載玻片 蓋玻片 吸水紙 培養皿 冰箱

步驟

一、蝗蟲精巢壓片標本的制備

1.  采集:采集到各期分裂相的標本是實驗成功的關鍵,解決這一關鍵要把握兩點
(1)時間:沈陽地區采集,一般在8月15至25日為宜。
(2)蟲體特征:雄蟲翹膀長到剛好蓋住腹部一半時,正好是雄蟲精子發生的峰季,采集最適。
(3)在公園、田埂、河邊、路旁的草叢中均可采到。

2.  取材:將采到的雄蟲,用大頭針固定在木板或紙盒上,沿腹部背中線剪開體壁,見消化管背側的淺黃色結構即是精巢,用鑷子分離出來。

3.  固定:把取出的精巢立即放入Carnoy固定液中,固定1小時,在期間用大頭針小心分離精細管,加速固定,促進脂肪溶解。固定后移入70%乙醇中存放于4℃冰箱備用。

4.  染色:取固定好的精細管2~3條,置于干凈載玻片中央,用45%醋酸處理5分鐘,用吸水紙吸干后,加1~2滴醋酸洋紅染色15分鐘。

5.  壓片:在染色材料上蓋上蓋玻片,再在蓋玻片上放一塊吸水紙,用大拇指垂直在蓋玻片上適力下壓(壓片時不要滑動蓋片)使精細管破裂細胞平展開,吸去溢出的染液,即可觀察。

二、蝗蟲精子發生過程減數分裂的鏡下觀察

蝗蟲精巢是由多條圓柱形的精細管組成,每條精細管由于生殖細胞發育階段的差別可分成若干區,良好壓片可見到從游離的頂端起始依次為精原細胞、精母細胞、精細胞及精子等各發育階段的區域。

1.  精原細胞(Spermatogonia)位于精細管的游離端,胞體較小,由有絲分裂來增殖,其染色體較粗短、染色較濃。

2.  減數分裂I(Meiotic division I)  減數分裂 l 是從初級精母細胞到次級精母細胞的一次分裂。

(1)前期I(Prophase I)在減數分裂中,以前期I最有特征性、核的變化復雜,依染色體變化,又可分為下列各期:

①細線期(Leptotene stage)染色體呈細長的絲,稱為染色線。彎曲繞成一團,排列無規則,染色線上有大小不一的染色粒,形似念珠,核仁清楚。

②偶線期(zygotene stage)同源染色體開始配對,同時出現極化現象,各以一端聚集于細胞核的一側,另一端則散開,形成花束狀。

③粗線期(Pachytene stage)每對同源染色體聯合完成,縮短成較粗的線狀,稱為雙價染色體,因其由四條染單體組成,又叫四分體。

④雙線期(Diplotene stage)染色體縮的更短些,同源染色體開始有彼此分開的趨勢,但因兩者相互絞纏,有多點交叉,所以這時的染色體呈現麻花狀。

⑤終變期(Diakinesis) 染色體更為粗短,形成Y、V、O等形狀,終變期末核膜、核仁消失。

(2)中期I(Metaphase I)核膜和核仁消失,紡錘體形成,雙價染色體排列于赤道面,著絲點與紡錘絲相連。這時的染色體組居細胞中央,側面觀呈板狀,極面觀呈空心花狀。

(3)后期I(Anaphase I)由于紡錘絲的解聚變短,同源的兩條染色體彼此分開,分別向兩極移動。但每條染色體的著絲粒尚未分裂,故兩條姐妹染色單體仍連在一起同去一極。

(4)末期I(Telophase I)移動到兩極的染色體,呈聚合狀態,并解旋,同時核膜形成,胞質也均分為二,即形成兩個次級精母細胞,這時每個新核所含染色體的數目只是原來的一半。到此減數分裂I結束。

3.  減數分裂Ⅱ(Meiotic divisison Ⅱ)減數分裂Ⅱ類似一般的有絲分裂,但從細胞形態上看,可見胞體明顯變小,染色體數目少。

(1)前期Ⅱ(Prophase Ⅱ)末期I的細胞進入前期Ⅱ狀態,每條染色體的兩個單體顯示分開的趨勢,染色體象花瓣狀排列,使前期Ⅱ的細胞呈實心花狀。

(2)中期Ⅱ(MetaphaseⅡ)紡錘體再次出現,染色體排列于赤道面。

(3)后期Ⅱ(AnaphaseⅡ)著絲粒縱裂,每條染色體的兩條單體彼此分離,各成一子染色體,分別移向兩極。

(4)末期Ⅱ(TelophaseⅡ)移到兩極的染色體分別組成新核,新細胞的核具單倍數(n)的染色體組,胞質再次分裂,這樣,通過減數分裂每個初級精母細胞就形成了四個精細胞。

4.  精子形成  在兩次精母細胞分裂過程中,各種細胞器,如,線粒體、高爾基體等也大致平均地分到四個精細胞中,精細胞經一系列的分化成熟為精子。鏡下精子頭部呈梭形,由細胞核及頂體共同組成,尾部細長呈線狀。

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