皮膚和黏膜感染病毒標本的采集與處理

簡介

在臨床上，皮膚和黏膜病毒感染分為兩大類，即原發性感染和復發性感染。原發性感染主要發生于青少年和無特異性免疫力者，復發性感染則往往發生于成人和有免疫力者。

病毒在天然宿主體內介于原發性感染和復發性感染之間的一段時間，稱之為潛伏性感染。潛伏感染（latent infection）是病毒的持續性感染狀態。病毒感染人體后，病毒基因存在于一定的組織或細胞中，由于機體免疫功能足以將病毒局限化而不引起顯性感染，也不出現臨床癥狀，但又不足以將病毒清除，病毒便可長期潛伏下來，待機體免疫功能下降時，則可引起顯性感染。

皮膚和黏膜是人體抗病毒感染的第一道防線。由病毒引發的皮膚和黏膜的病情可以是單獨的皮膚疾病，或是伴發全身疾患，其治療效果由患者病情嚴重程度而定。

病毒的分離培養仍為當前明確診斷皮膚和黏膜病毒感染的金標準。常見的標本有水皰液、咽喉拭子、陰道拭子、腦脊液或腦活檢組織、角膜刮取物（角膜拭子）、痰液、唾液、血液、尿液等。

材料與儀器

器材：
①一次性無菌手套
②標本采集管
③棉簽拭子

試劑：
①材料：待采標本
②緩沖液

步驟

皮膚和黏膜感染病毒標本的采集與處理的基本步驟可分為如下幾種：

一、標本采集

1．水皰液 用無菌注射器針頭從成熟的水皰中抽取液體至少1 ml，注入裝有病毒運送液的滅菌小瓶中（可加適量抗生素），加蓋密封，盡快冷凍保存；水皰樣本采集部位用清水清洗，切忌用酒精、碘酒等消毒劑消毒、擦拭。

也可用消毒針將水皰刺破，然后用無菌棉拭子蘸取皰疹液，迅速將棉簽放入裝有2 ml病毒保存液或Hanks液的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封。新鮮水皰液病毒培養的陽性率大于70％ ，膿皰液為70％ ～80％ 。

有時也可剪取新鮮水皰皮3～5 g迅速放入無菌小瓶中，加適量（2倍體積）50％ 甘油或磷酸鹽緩沖液，加蓋密封，盡快送檢。
在無法采集水皰液或水皰皮時，可采集腦脊液、唾液等樣本。

2．陰道拭子 使用經消毒和干燥并不粘有任何化學物質或潤滑劑的棉拭子、刮板或吸管取材。根據不同的檢驗目的而選取不同部位。一般采用生理鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道后穹隆、宮頸管口等處取材；或用無潤滑劑的擴陰器使宮頸可見，用拭子從宮頸上拭去黏液和分泌物，丟掉拭子，用新的菌拭子緊貼宮頸內道輕輕采樣。

3．腦脊液 由臨床醫生嚴格按照腰椎穿刺術相應操作規程進行采集。一般選擇患者第3和第4腰椎間隙或稍低處穿刺取得，兒童則于第4和第5腰椎間隙穿刺，必要時可從小腦延腦池或側腦室穿刺獲得。

4．角膜刮取物 在麻醉作用下，用無菌棉拭子從角膜邊緣取材，立即送檢。

5．唾液 混合性唾液容易采集，午后2～4小時，由受檢者自行收集或由醫務人員幫助采集。采集時需先用清水漱口，靜息5～10分鐘，棄去最初分物的唾液，將繼續分泌的唾液收集于潔凈的小杯內，至少需要2 ml。若唾液量不足，可囑其做口舌運動，促進分泌。也可于舌下放一小塊無菌干燥的脫脂紗布以使其吸收唾液，10分鐘后取出，擠出唾液備用。

6．血液: 血液標本采集一般選用靜脈采血法，通常采用肘部靜脈。根據采血量不同，可選用不同型號的注射器。如遇患者采血后發生暈針，可讓其平臥，休息片刻即可恢復。

7．尿液 選用清潔、干燥、較大開口的一次性容器，根據檢驗目的不同可選擇晨尿、隨機尿、餐后尿或計時尿。

二、標本處理

標本在病毒分離之前一般需要處理，有時也無需任何處理即可進行病毒的分離。標本處理的目的是提高病毒分離率，防止標本污染。腦脊液標本不需處理，可直接用于病毒的分離。皰疹液經青霉素、鏈霉素處理后直接用于病毒的分離。各種生物標本類似于組織標本，所以生物標本可以按組織標本的處理方法處理。

注意事項

（1）皰疹液采集后應立即送檢，可在4 ℃暫存。未能及時檢測的，應在-20 ℃以下低溫冷凍保存，需長期保存的樣本，應置-70 ℃或以下保存；陰道標本采集前24小時禁止性生活、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等，以免影響檢查結果。
（2）在提取唾液樣本前的30分鐘內，請勿進食、飲水、吸煙或嚼口香糖。
（3）唾液標本收集后應立即送檢，室溫下放置后pH上升，細菌繁殖，容易析出沉淀，導致其化學成分發生改變。