抗菌藥物試管實(shí)驗(yàn)
原理
濃度系列稀釋法時(shí)把藥物稀釋成不同的系列濃度,混入培養(yǎng)基內(nèi),加入一定量的試驗(yàn)菌,經(jīng)適宜溫度培養(yǎng)后觀察結(jié)果,求得藥物的最低抑菌濃度(MIC)。
材料與儀器
金黃色葡萄球菌
肉湯培養(yǎng)基 藥液
試管 金黃色葡萄球菌 肉湯培養(yǎng)基、藥液 刻度移液管
步驟
1. 按無(wú)菌操作在每管中加入肉湯培養(yǎng)基1ml。
2. 于第1管加入原濃度藥液1ml,混勻后吸取1ml加入第2管,同樣混勻后吸取1ml加入第3管,依次類(lèi)推,將藥液對(duì)倍稀釋至第9管后取出1ml棄去。第10管不加藥物,作對(duì)照。
3. 第1管至第10管各加入上述菌液0.1ml,混勻。
4. 置37℃恒溫箱經(jīng)18~24小時(shí)培養(yǎng)后觀察各管細(xì)菌生長(zhǎng)情況。
5. 結(jié)果判斷:以完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的藥物最高稀釋倍數(shù)為該藥物對(duì)該細(xì)菌的最低抑菌濃度(MIC)。
注意事項(xiàng)
1. 稀釋的準(zhǔn)確性:每稀釋一種濃度換一支吸管,較一支吸管稀釋到底準(zhǔn)確些。
2. 加入菌液的濃度:菌液濃度大時(shí),則最小抑菌濃度藥高,反之亦然。
3. 菌齡:一般認(rèn)為幼齡菌較敏感,所以多用細(xì)菌的6小時(shí)培養(yǎng)液。