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SMART技術在合成cDNA的反應中事先加入的3'末端帶Oligo（dG）的SMART引物，由于逆轉錄酶以mRNA為模板合成cDNA，在到達mRNA的5'末端時碰到真核mRNA特有的“帽子結構”，即甲基化的...

防止RNA酶污染的措施在所有RNA實驗中，最關鍵的因素是分離得到全長的RNA。而實驗失敗的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶廣泛存在而穩定，一般反應不需要輔助因子。因而RNA制劑中只...

如何做好RNA質控樣品中RNA的純度及整體質量對于后續的實驗有重要的影響。以下是進行PCRarray前RNA質控的推薦標準：定量：NanoDrop/Spectrophotometer（用于檢測樣本中的核酸濃度，蛋白與核酸的比例及...

針對RNA酶的一些注意事項防止RNA酶污染的措施：1、所有的玻璃器皿均應在使用前于180℃的高溫下干烤6hr或更長時間。2、塑料器皿可用0.1%DEPC水浸泡或用氯仿沖洗（注意：有機玻璃器具因可被氯仿腐蝕，故不能...

全血RNA快速提取操作步驟：提示：（1）第一次使用前請先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量無水乙醇！（2）使用前將10X紅細胞裂解液RLB用DEPC處理水稀釋到1X。（3）操作前在裂解液RLT中加入β-巰...

全長Cdna全長cDNA是由mRNA反轉錄，通過逆轉錄酶以mRNA為模板合成第一鏈，再通過DNA聚合酶合成第二鏈。全長cDNA包含5’和3’UTR區和編碼區（CDS）。

微量RNA的抽提RNeasyMinEluteSpinColumn（QIAGEN）抽提微量RNA的柱子最大可以吸附45ug的RNA。·為了更好地裂解，細胞數不能大于5×105，細胞過多會減低產率和純度。準備工作：1.在24ml96－100％...

RNA的定量和完整性分析RNA的完整性可以通過瓊脂糖變性電泳分析檢測,而含量則通過紫外分光光度計確定。常見的變性電泳有甲醛變性電泳，戊二醛變性電泳等。甲醛變性電泳檢測RNA完整性一、材料、試劑和儀器1材...