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RNA酶活性的控制為了獲得高質(zhì)量的真核細(xì)胞mRNA,必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細(xì)胞和滅活RNA酶同步進(jìn)行的方法，最大限度地降低細(xì)胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。同時(shí)，避免偶然引入實(shí)驗(yàn)室...

ATP的生物合成一、目的1.了解ATP生物合成的意義。2.掌握無機(jī)磷的測定方法。3.掌握DEAE-纖維素薄板層析法測ATP的形成。二、原理在適當(dāng)條件下，釀酒酵母分解發(fā)酵液中的葡萄糖，釋出能量，同時(shí)還利用無機(jī)磷...

siRNA的制備方法介紹體外制備1.化學(xué)合成許多國外公司都可以根據(jù)用戶要求提供高質(zhì)量的化學(xué)合成siRNA。主要的缺點(diǎn)包括價(jià)格高，定制周期長，特別是有特殊需求的。由于價(jià)格比其他方法高，為一個(gè)基因合成3―4對siR...

Northernblot實(shí)驗(yàn)步驟一、經(jīng)乙二醛和二甲基亞砜變性處理后進(jìn)行的RNA電泳這一方法原于McMaster和Carmichael（1977）。含有乙二醛－DMSO的凝膠比含有甲醛的凝膠更難于進(jìn)行電泳，因?yàn)榍罢哂緞?dòng)速率較慢而且需...

RNA的提取RNA提取物的完整性是進(jìn)行電泳的主要目的之一。在有EB存在時(shí)，完整未降解的RNA制品電泳圖譜應(yīng)可清晰看到18SrRNA、28SrRNA兩條帶，也應(yīng)當(dāng)能看到一條由tRNA、5.8SrRNA和5SrRNA組...

RNaseProtectionAssay--RNA酶保護(hù)試驗(yàn)RNA酶保護(hù)試驗(yàn)(RNaseProtectionAssay,RPA)是通過液相雜交的方式,用反義RNA探針與樣品雜交，以檢測RNA表達(dá)的技術(shù)。與Northern雜交和RT-PCR比較，R...

RNA原位雜交中的探針種類RNA探針是指帶有標(biāo)記的能與組織內(nèi)相對應(yīng)的核苷酸序列互補(bǔ)結(jié)合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據(jù)在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種：即特異性cDNA，cRNA探針和人...

外源ＤＮＡ片段和線狀質(zhì)粒載體的連接外源ＤＮＡ片段和線狀質(zhì)粒載體的連接，也就是在雙鏈ＤＮＡ５'磷酸和相鄰的3'羥基之間形成的新的共價(jià)鏈。如質(zhì)粒載體的兩條鏈都帶5'磷酸，可生成４個(gè)新的磷酸二酯鏈。但...