目的基因
需研究的基因稱為目的基因,需分析的基因稱靶基因,在基因克隆過程中有時兩者均稱為插入基因,有時三者含義相近。簡單的原核生物目的基因可從細(xì)胞核中直接分離得到,但人類的基因分布在23對染色體上,較難從直接法得到。簡短的目的基因可在了解一級結(jié)構(gòu)或通過了解多肽鏈一級結(jié)構(gòu)氨基酸編碼的核苷酸序列基礎(chǔ)上人工合成。但多數(shù)的目的基因由mRNA合成cDNA(complementary DNA,反轉(zhuǎn)錄DNA)得到。CDNA通過各種方式與載體連接,克隆可得到全長cDNA或片段,用于探針制備、序列分析、基因表達(dá)等研究。因此以cDNA為研究材料反映了mRNA的轉(zhuǎn)錄及對以后翻譯的影響情況,即反映某一基因(DNA)外顯子的情況。
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