Qβ復制酶反應

Kacian等于1972年首次報報Qβ復制酶(Q-beta replicase)催化RNA模板的自我復制功能，它能在常溫30min，將其天然模模MDV-1RNA擴增至109.1986年Chu等報道用生物標記的靶序列特異性探針，可與親和素聯(lián)接的MDV-1RNA雜交，經(jīng)洗脫未被結合的MDV-1后，再加入Qβ復制酶，擴增復制MDV-1拷貝，然后用溴乙錠染色檢測或用同源性的第二探針雜交.
　　Qβ復制酶是一種RNA指導的RNA聚合酶，它有3個特點:

①不需寡核苷酸引物的引導就可啟動RNA的合成.

②能特異地識別RNA基因中由于分子內堿基配對而形成的特有的RNA折疊結構.

③在Qβ復制酶的天然模板MDV-1RNA的非折疊結構區(qū)插入一短的核酸序列不影響該酶的復制.因而，如在此區(qū)插入核酸探針，則其序列照樣可能被Qβ復制酶擴增.
　　1988年Lizardi等，將靶基因序列插進MDV-1質粒里，用T7RNA聚合酶催化轉錄出MDV-1RNA探針，這種RNA探針可與靶序列雜交，然后洗去非雜交的探針，加入Qβ復制酶來擴增探針，被擴增的探針又可作為模板進行擴增，并呈指數(shù)遞增.其產(chǎn)物按上述兩種方法進行檢測.現(xiàn)在該技術又發(fā)展了夾心雜交法，分子開關和靶依賴的復制等技術.

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