40種常用細胞培養基配方
相關專題
細胞培養基的配制 細胞培養專題
31營養瓊脂
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
氯化鈉 5g
瓊脂 15~20g
蒸餾水 1000mL
制法:將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內,加入15%氫氧化鈉溶液約2mL,校正pH至7.2~7.4。加入瓊脂,加熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min。
注:此培養基可供一般細菌 培養之用,可傾注平板或制成斜面。如用于菌落計數,瓊脂量為1.5%;如作成平板或斜面,則應為2%。
32營養肉湯
成分:
蛋白陳 10g
牛肉膏 3g
氯化鈉 5g
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分裝燒瓶,每瓶225mL,121℃高壓滅菌15min。
33 乳糖膽鹽發酵管
成分:
蛋白胨 20g
豬膽鹽(或牛,羊膽鹽) 5g
乳糖 10g
0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:將蛋白胨,膽鹽及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示劑,分裝每管10mL,并放入一個小倒管,115℃高壓滅菌15min。
注:雙料乳糖膽鹽發酵管除蒸餾水外,其他成分加倍。
34乳糖發酵管
成分:
蛋白胨 20g
乳糖 10g
0.04%溴甲酚紫水溶液 25mL
蒸餾水 1000mL
pH7。4
制法:將蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示劑,按檢驗要求分裝30mL,10mL或3mL,并放入一個小倒管,115℃高壓滅菌15min。
注:①雙料乳糖發酵管除蒸餾水外,其他成分加倍。
②30mL和10mL乳糖發酵管專供醬油及醬類檢驗用,3mL乳糖發酵管供大腸菌群證實試驗用。
35 EC肉湯
成分:
胰蛋白胨 20g
3號膽鹽(或混合膽鹽) 1.5g
乳糖 5g
磷酸氫二鉀 4g
磷酸二氫鉀 1.5g
氯化鈉 5g
蒸餾水 1000mL
制法:將上述成分混合,溶解后,分裝有發酵倒管的試管中,121℃高壓滅菌15min,最終pH為6.9%26plusmn;0.2。
36 緩沖蛋白胨水(BP)
成分:
蛋白胨 10g
氯化鈉 5g
磷酸氫二鈉(Na2HPO4%26bull;12H2O) 9g
磷酸二氫鉀 1.5g
蒸餾水 1000mL
pH7.2
制法:按上述成分配好后以大燒瓶裝,121℃高壓滅菌15min。臨用時無菌分裝每瓶225mL。
注:本培養基供沙門氏菌前增菌用。
37 氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)
甲液
胰蛋白胨 5g
氯化鈉 8g
磷酸二氫鉀 1。6g
蒸餾水 1000mL
乙液
氯化鎂(化學純) 40g
蒸餾水 100mL
4。13.3 丙液
0。4%孔雀綠水溶液。
制法:分別按上述成分配好后,121℃高壓滅菌15min備用。臨用時取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以無菌操作混合即可。
注:本培養基亦稱Rappaport 10(R10)增菌液。
38 四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)
基礎培養基
多胨或眎胨 5g
膽鹽 1g
碳酸鈣 10g
硫代硫酸鈉 30g
蒸餾水 1000mL
碘溶液
碘 6g
碘化鉀 5g
蒸餾水 20mL
制法:將基礎培養基的各成分加入蒸餾水中,加熱溶解,分裝每瓶100mL。分裝時應隨時振搖,使其中的碳酸鈣混勻。121℃高壓滅菌15min備用。臨用時每100mL基礎培養基中加入碘溶液2mL,0.1%煌綠溶液1mL。
39 四硫磺酸鈉煌綠增菌液(換用方法)
基礎液:
蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
氯化鈉 3g
碳酸鈣 45g
蒸餾水 1000mL
將各成分加入于蒸餾水中,加熱至約70℃溶解,校正pH至7.0%26plusmn;0.1,121℃高壓滅菌20min。
硫代硫酸鈉溶液
硫代硫酸鈉(Na2S2O3%26bull;5H2O) 50g
蒸餾水 加至100mL
碘溶液
碘片 20g
碘化鉀 25g
蒸餾水加至 100mL
將碘化鉀充分溶解于是少量的蒸餾水中,加入碘片,振搖玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸餾水至規 定量。貯于棕色玻瓶內,緊塞瓶蓋備用。
煌綠水溶液
煌綠 0.5g
蒸餾水 100mL
存放暗處,不少于1d,使其自然滅菌。
牛膽鹽溶液
干燥的牛膽鹽 10g
蒸餾水 100mL
煮沸溶解,121℃高壓滅菌20min。
制備:
基礎液 900mL
硫代硫酸鈉溶液 100mL
碘液 20mL
煌綠溶液 2mL
牛膽鹽溶液 50mL
臨用前,按上列順序,以無菌操作依次加入于基礎液中,每加入一種成分,均應搖勻后再加入另一種成分。分裝于滅菌瓶中,每瓶100mL。
40 亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)
成分:
蛋白胨 5g
乳糖 4g
亞硒酸氫鈉 4g
磷酸氫二鈉 5.5g
磷酸二氫鉀 4.58
L-胱氨酸 0.01g
蒸餾水 1000mL
1%L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液的配法:稱取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氫氧化鈉1.5mL,使溶解,再加入蒸餾水8.5mL即成。
制法:將除亞硒酸氫鈉和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸餾水中,加熱煮沸,俟冷備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中,加熱煮沸,候冷,以無菌操作與上液混合。再加入1%L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液1mL。分裝于滅菌瓶中,每瓶100mL,pH應為7.0%26plusmn;0.1。
41 GN增菌液
成分:
胰蛋白胨 20g
葡萄糖 1g
甘露醇 2g
檸檬酸鈉 5g
去氧膽酸鈉 0.5g
磷酸氫二鉀 4g
磷酸二氫鉀 1.5g
氯化鈉 5g
蒸餾水 1000mL
pH7.0
制法:按上述成分配好,加熱使溶解,校正pH。分裝每瓶225mL,115℃高壓滅菌15min。
42 腸道菌增菌肉湯
成分:
蛋白胨1 10g
葡萄糖 5g
牛膽鹽 20g
磷酸氫二鈉 8g
磷酸二氫鉀 2g
煌綠 0.015g
蒸餾水 1000mL
pH7.2
制法:按上述成分配好,加熱使溶解,校正pH。分裝每瓶30mL,115℃高壓滅菌15min。
43 亞硫酸鉍瓊脂(BS)
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
葡萄糖 5g
硫酸亞鐵 0.3g
磷酸氫二鈉 4g
煌綠 0.025g
檸檬酸鉍銨 2g
亞硫酸鈉 6g
瓊脂 18~20g
蒸餾水 1000mL
pH7.5
制法:
1 將前面5種成分溶解于300mL蒸餾水中。
2 將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50mL蒸餾水溶解。
3 將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解,冷至80℃
4 將以上三液合并,補充蒸餾水至1000mL,校正pH,加0.5%煌綠水溶液5mL,搖勻。冷至50~55℃,傾注平皿。
注:此培養基不需高壓滅菌。制備過程不宜過分加熱。以免降低其選擇性。應在臨用前一天制備,貯存于室溫暗處。超過48h不宜使用。
44 DHL瓊脂
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
去氧膽酸鈉 1g
硫代硫酸鈉 2.3g
檸檬酸鈉 1g
檸檬酸鐵銨 1g
中性紅 0.03g
瓊脂 18~20g
蒸餾水 1000mL
pH7.3
制法:將除中性紅和瓊脂以外的成分溶解于400mL蒸餾水中,校正pH。 再將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解,兩液合并,并加入0.5%中性紅水溶液6mL,待冷至50~55℃,傾注平板。
45 HE瓊脂
成分:
脙胨 12g
牛肉膏 3g
乳糖 12g
蔗糖 12g
水楊素 2g
膽鹽 20g
氯化鈉 5g
瓊脂 18~20g
蒸餾水 1000mL
0.4%溴麝香草酚藍溶液 16mL
Andrade指示劑 20mL
甲液 20mL
乙液 20mL
pH7.5
制法:將前面七種成分溶解于400mL蒸餾水內作為基礎液;將瓊脂加入于600mL蒸餾水內,加熱溶解。加入 甲液和乙液于基礎液內,校正pH。再加入指示劑,并與瓊脂液合并,待冷至50~55℃,傾注平板。
注:①此培養基不可高壓滅菌。
②甲液的配制
硫代硫酸鈉 34g
檸檬酸鐵銨 4g
蒸餾水 100mL
②乙液的配制
去氧膽酸鈉 10g
蒸餾水 100mL
②Andrade指示劑
酸性復紅 0.5g
1mol/L氫氧化鈉溶液 16mL
蒸餾水 100mL
將復紅溶解于蒸餾水中,加入氫氧化鈉溶液。數小時后如復紅褪色不全,再加氫氧化鈉溶液1~2mL。
46 SS瓊脂
基礎培養基:
牛肉膏 5g
眎胨 5g
三號膽鹽 3.5g
瓊脂 17g
蒸餾水 1000mL
再將兩液混合,121℃高壓滅菌15min,保存備用。
完全培養基:
基礎培養基 100mL
乳糖 10g
檸檬酸鈉 8.5g
硫代硫酸鈉 8.5g
10%檸檬酸鐵溶液 10mL
1%中性紅溶液 2.5mL
0.1%煌綠溶液 0.33mL
加熱溶化基礎培養基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均勻,校正至pH7.0,加入中性紅和煌綠溶液,傾注平板。
注:①制好的培養基宜當日使用,或保存于冰箱內于48h內使用。
②煌綠溶液配好后應在10d以內使用。
③可以購用SS瓊脂的干燥培養基。
47 WS瓊脂
成分:
②胨 12g
牛肉膏 3g
氯化鈉 5g
乳糖 12g
蔗糖 12g
十二烷基硫酸鈉 2g
瓊脂 15g
Andrade指示劑 20mL
0.4%溴麝香草酚藍溶液 16mL
甲液 20mL
蒸餾水 1000mL
pH7.0
制法:除指示劑和甲液外,將其他成分加熱溶解,不需消毒,校正pH后加入指示劑和甲液,傾注平板應呈草綠色。
注:①供沙門氏菌分離用。
②Andrade指示劑和甲液的配制均見HE瓊脂。
48 麥康凱瓊脂
成分:
蛋白胨 17g
眎胨 3g
豬膽鹽(或牛,羊膽鹽) 5g
氯化鈉 5g
瓊脂 17g
蒸餾水 1000mL
乳糖 10g
0.01%結晶紫水溶液 10mL
0.5%中性紅水溶液 5mL
制法:
1 將蛋白胨,眎,膽鹽和氯化鈉溶解于400mL蒸餾水中,校正pH7.2。將瓊脂加入600mL
加熱溶解。將兩液合并,分裝于燒瓶內,121℃高壓滅菌15min備用。
2 臨用時加熱溶化瓊脂,趁熱加入乳糖,冷至50~55℃時,加入結晶紫和中性紅水溶液,搖勻后傾注平板。
注:結晶紫及中性紅水溶液配好后須經高壓滅菌。
49 伊紅美藍瓊脂(EMB)
成分:
蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氫二鉀 2g
瓊脂 17g
2%伊紅Y溶液 20mL
0.65%美藍溶液 10mL
蒸餾水 1000mL
pH7.1
制法:將蛋白胨,磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH,分裝于燒瓶內,121℃高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷至50~55℃,加入伊紅和美藍溶液,搖勻,傾注平板。
50三糖鐵瓊脂(TSI)
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 5g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
硫酸亞鐵銨〔Fe(NH4)2(SO4)2?6H2O〕 0.2g
硫代硫酸鈉 0.2g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH。加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5mL,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min。放置高層斜面備用。
51 三糖鐵瓊脂(換用方法)
成分:
蛋白胨 15g
眎胨 5g
牛肉膏 3g
酵母膏 3g
乳糖 10g
蔗糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
硫酸亞鐵 0.2g
硫代硫酸鈉 0.3g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH。加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入0。2%酚紅水溶液12。5mL,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min,放置高層斜面備用。
52 克氏雙糖鐵瓊脂(KI)
上層培養基成分
血消化湯(pH7.6) 500mL
瓊脂 6.5g
硫代硫酸鈉 0.1g
硫酸亞鐵銨 0.1g
乳糖 5g
0.2%酚紅溶液 5mL
下層培養基成分
血消化湯(pH7.6) 500mL
瓊脂 2g
葡萄糖 1g
0.2%酚紅溶液 5mL
制法:
1 取血消化湯按上層和下層的瓊脂用量,分別加入瓊脂,加熱溶解。
2 分別加入其他各種成分。將上層培養基分裝于燒瓶內;將下層培養基分裝于滅菌12mm%26times;100mm試管內,每管約2mL。115℃高壓滅菌10min。
3 將上層培養基放在56℃水浴箱內保溫;將下層培養基直立放在室溫內,使其凝固。
4 當下層培養基凝固后,以無菌手續將上層培養基分裝于下層培養基的上面,每管約1.5mL,放成斜面。
53 克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法)
成分:
蛋白胨 20g
牛肉膏 3g
酵母膏 3g
乳糖 10g
葡萄糖 1g
氯化鈉 5g
檸檬酸鐵銨 0.5g
硫代硫酸鈉 0.5g
瓊脂 12g
酚紅 0.025g
蒸餾水 1000mL
pH7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH。加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入0。2%酚紅水溶液12。5mL,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到比較高的底層。121℃高壓滅菌15min。放置高層斜面備用。
54 葡萄糖半固體發酵管
成分:
蛋白胨 1g
牛肉膏 0.3g
氯化鈉 0.5g
1。6%溴甲酚紫酒精溶液 0.1mL
葡萄糖 1g
瓊脂 0.3g
蒸餾水 100mL
pH7.4
制法:將蛋白胨,牛肉膏和氯化鈉加入于水中,校正pH后加入瓊脂加熱溶解,再加入指示劑和葡萄糖,分裝小試管,滅菌121℃ 15 min。
55 5%乳糖發酵管
成分:
蛋白胨 0.2g
氯化鈉 0.5g
乳糖 5g
2%溴麝香草酚藍水溶液 1.2mL
蒸餾水 100mL
pH7.4
制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸餾水內,校正pH。將乳糖溶解于另外50mL蒸餾水內,分別滅菌121℃ 15min,將兩液混合,以無菌操作分裝于滅菌小試管內。
注:在此培養基內,大部分乳糖遲緩發酵的細菌可于1d內發酵。
56 CAYE培養基
此培養基附在腸毒素診斷試劑盒內,如無此培養基,亦可用Honda氏產毒肉湯。
57 Honda氏產毒肉湯
成分:
水解酪蛋白 20g
酵母浸膏粉 10g
氯化鈉 2.5g
磷酸氫二鈉 15g
葡萄糖 5g
微量元素 0.5mL
蒸餾水 1000mL
pH7.5
制法:溶解后校正pH,高壓滅菌121℃ 15min,待冷至45~50℃時,加入林可霉素溶液,每毫升培養基內含90%26mu;g。
微量元素配方:硫酸鎂 5g,氯化鐵 0.5g,氯化鉆 2g,蒸餾水 100mL
58 Elek氏培養基(毒素測定用)
成分:
胨 20g
麥芽糖 3g
乳糖 0.7g
氯化鈉 5g
瓊脂 15g
40%氫氧化鈉溶液 1.5mL
蒸餾水 1000mL
pH7.8
制法:用500mL蒸餾水溶解瓊脂以外的成分,煮沸,并用濾紙過濾。用1mo1/L氫氧化鈉校正pH。用另外500mL蒸餾水加熱溶解瓊脂。將兩液混合,分裝試管10mL或20mL。121℃高壓滅菌15min。臨用時加熱溶化瓊脂傾注平板。
59 氯化鎂孔雀綠羧芐青霉素培養基
成分:
甲液:胰蛋白胨 10g
蒸餾水 1000mL
乙液:磷酸氫二鈉 9.5g
蒸餾水 1000mL
丙液:氯化鎂(MgCl2%26bull;6H2O) 40g
蒸餾水 400mL
以上分別在121℃滅菌15min。
丁液:孔雀綠 0.2g
蒸餾水 100mL
戊液:羧芐青霉素 1mg/mL
制法:取甲液620mL,乙液160mL,丙液212mL混合,再加入丁液6.4mL和戊液2.4mL,即為1000mL培養基。分裝滅菌燒瓶,每瓶100mL,或滅菌試管10mL。
60 胰蛋白胨水
成分:
胰蛋白胨 10g
蒸餾水 1000mL
pH7.0
制法:將上述成分溶解,校正pH。分裝試管,121℃高壓滅菌15min。
61 Rustigian氏尿素培養液
成分:
尿素 20.0g
酵母浸膏 0.1g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.091g
磷酸氫二鈉(Na2HPO4) 0.095g
酚紅 0.01g
蒸餾水 1000mL
制法:將上述成分:于蒸餾水中溶解,校正pH為6.8%26plusmn;0.2。 不要加熱,過濾除菌,無菌分裝于滅菌小試管 中,每管為約3mL。
用途:尿素酶試驗用。
62 氯化鈉結晶紫增菌液
成分:
蛋白胨 20g
氯化鈉 40g
0.01%結晶紫溶液 5mL
蒸餾水 1000mL
pH9.0
制法:
除結晶紫外,其他按上述成分:配好,加熱溶解。約加30%氫氧化鉀溶液4。5mL,校正pH。加熱煮沸,過濾。再加入結晶紫溶液,混合后分裝試管。121℃高壓滅菌15min。
63 氯化鈉蔗糖瓊脂
成分:
蛋白胨 10g
牛肉膏 10g
氯化鈉 50g
蔗糖 10g
瓊脂 18g
0.2%溴麝香草酚藍溶液 20mL
蒸餾水 1000mL
pH7.8
制法:將牛肉膏,蛋白胨及氯化鈉溶解于蒸餾水中,校正pH。加入瓊脂,加熱溶解,過濾。加入指示劑,分裝燒瓶100mL。121℃高壓滅菌15min備用。臨用前在100mL培養基內加入蔗糖1g,加熱溶化并冷至50℃,傾注平板。
64 嗜鹽菌選擇性瓊脂
成分:
蛋白胨 20g
氯化鈉 40g
瓊脂 17g
0.01%結晶紫溶液 5mL
蒸餾水 1000mL
pH8.7
制法:除結晶紫和瓊脂外,其他按上述成分配好,校正pH。加入瓊脂,加熱溶解。再加入結晶紫溶液,分裝燒瓶,每瓶100mL。
65 3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂
成分:
三糖鐵瓊脂 1000mL
氯化鈉 30g
制法:按前面三糖鐵瓊脂,再加入氯化鈉30g,分裝試管,121℃高壓滅菌15min。放置高層斜面備用。
66 氯化鈉血瓊脂
成分:
酵母膏 3g
蛋白胨 10g
氯化鈉 70g
磷酸氫二鈉 5g
甘露醇 10g
結晶紫 0.001g
瓊脂 15g
蒸餾水 1000mL
制法:調pH8.0加熱30min(不必高壓),待冷至45℃左右時,加入新鮮人或兔血(5%~10%)混合均勻,傾注平皿。
67 3.5%氯化鈉生化試驗培養基
成分及制法:根據所需糖的種類按3.2配制。只是將氯化鈉含量改為3.5%,pH為7.7。
68 改良磷酸鹽緩沖液(小腸結腸炎耶爾森氏菌專用)
成分:
磷酸氫二鈉(Na2HPO4 8.23g
磷酸二氫鈉(NaH2PO4?H2O) 1.2g
氯化鈉(NaCl) 5.0g
三號膽鹽 1.5g
山梨醇 20g
制法:將磷酸鹽及氯化鈉溶于蒸餾水中,再加入三號膽鹽及山梨醇,溶解后校正pH為7.6,分裝試管,于121℃高壓滅菌15min,備用。
69 CIN-1培養基
基礎培養基
胰胨 20.0g
酵母浸膏 2.0g
甘露醇 20.0g
氯化鈉 1.0g
去氧膽酸鈉 2.0g
硫酸鎂(MgSO4?7H2O) 0.01g
瓊脂 12.0g
蒸餾水 950mL
pH7.5±0.1
將基礎培養基高壓滅菌。
Irgasan
以95%的乙醇作溶劑,溶解二苯醚,配成0。4%的溶液,待基礎液冷至80℃時,加入1mL混勻。
冷至50℃時,加入:
中性紅(3mg/mL) 10.0mL
結晶紫(0.1mg/mL) 10.0mL
頭孢菌素(1.5mg/mL) 10.0mL
新生霉素(0.25mg/mL) 10.0mL
最后不斷攪拌著加入10.0mL的10%氯化鍶,倒平皿。
70 嗜鹽性試驗培養基
成分:
蛋白胨 2g
氯化鈉 按不同量加
蒸餾水 100mL
pH7.7
制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。每瓶分別加入不同量的氯化鈉:(1)不加;(2)3g;(3)7g;(4)9g;(5)11g。待溶解后分裝試管,121℃高壓滅菌15min
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