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40種常用細胞培養基配方
發布日期:2023-08-14 09:32:19


40種常用細胞培養基配方


  • 相關專題

  • 細胞培養基的配制 細胞培養專題

31營養瓊脂

成分:

蛋白胨 10g

牛肉膏 3g

氯化鈉 5g

瓊脂 15~20g

蒸餾水 1000mL

制法:將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內,加入15%氫氧化鈉溶液約2mL,校正pH至7.2~7.4。加入瓊脂,加熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min。

注:此培養基可供一般細菌 培養之用,可傾注平板或制成斜面。如用于菌落計數,瓊脂量為1.5%;如作成平板或斜面,則應為2%。

32營養肉湯

成分:

蛋白陳 10g

牛肉膏 3g

氯化鈉 5g

蒸餾水 1000mL

pH7.4

制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分裝燒瓶,每瓶225mL,121℃高壓滅菌15min。

33 乳糖膽鹽發酵管

成分:

蛋白胨 20g

豬膽鹽(或牛,羊膽鹽) 5g

乳糖 10g

0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL

蒸餾水 1000mL

pH7.4

制法:將蛋白胨,膽鹽及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示劑,分裝每管10mL,并放入一個小倒管,115℃高壓滅菌15min。

注:雙料乳糖膽鹽發酵管除蒸餾水外,其他成分加倍。

34乳糖發酵管

成分:

蛋白胨 20g

乳糖 10g

0.04%溴甲酚紫水溶液 25mL

蒸餾水 1000mL

pH7。4

制法:將蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示劑,按檢驗要求分裝30mL,10mL或3mL,并放入一個小倒管,115℃高壓滅菌15min。

注:①雙料乳糖發酵管除蒸餾水外,其他成分加倍。

②30mL和10mL乳糖發酵管專供醬油及醬類檢驗用,3mL乳糖發酵管供大腸菌群證實試驗用。

35 EC肉湯

成分:

胰蛋白胨 20g

3號膽鹽(或混合膽鹽) 1.5g

乳糖 5g

磷酸氫二鉀 4g

磷酸二氫鉀 1.5g

氯化鈉 5g

蒸餾水 1000mL

制法:將上述成分混合,溶解后,分裝有發酵倒管的試管中,121℃高壓滅菌15min,最終pH為6.9%26plusmn;0.2。

36 緩沖蛋白胨水(BP)

成分:

蛋白胨 10g

氯化鈉 5g

磷酸氫二鈉(Na2HPO4%26bull;12H2O) 9g

磷酸二氫鉀 1.5g

蒸餾水 1000mL

pH7.2

制法:按上述成分配好后以大燒瓶裝,121℃高壓滅菌15min。臨用時無菌分裝每瓶225mL。

注:本培養基供沙門氏菌前增菌用。

37 氯化鎂孔雀綠增菌液(MM)

甲液

胰蛋白胨 5g

氯化鈉 8g

磷酸二氫鉀 1。6g

蒸餾水 1000mL

乙液

氯化鎂(化學純) 40g

蒸餾水 100mL

4。13.3 丙液

0。4%孔雀綠水溶液。

制法:分別按上述成分配好后,121℃高壓滅菌15min備用。臨用時取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以無菌操作混合即可。

注:本培養基亦稱Rappaport 10(R10)增菌液。

38 四硫磺酸鈉煌綠增菌液(TTB)

基礎培養基

多胨或眎胨 5g

膽鹽 1g

碳酸鈣 10g

硫代硫酸鈉 30g

蒸餾水 1000mL

碘溶液

碘 6g

碘化鉀 5g

蒸餾水 20mL

制法:將基礎培養基的各成分加入蒸餾水中,加熱溶解,分裝每瓶100mL。分裝時應隨時振搖,使其中的碳酸鈣混勻。121℃高壓滅菌15min備用。臨用時每100mL基礎培養基中加入碘溶液2mL,0.1%煌綠溶液1mL。

39 四硫磺酸鈉煌綠增菌液(換用方法)

基礎液:

蛋白胨 10g

牛肉膏 5g

氯化鈉 3g

碳酸鈣 45g

蒸餾水 1000mL

將各成分加入于蒸餾水中,加熱至約70℃溶解,校正pH至7.0%26plusmn;0.1,121℃高壓滅菌20min。

硫代硫酸鈉溶液

硫代硫酸鈉(Na2S2O3%26bull;5H2O) 50g

蒸餾水 加至100mL

碘溶液

碘片 20g

碘化鉀 25g

蒸餾水加至 100mL

將碘化鉀充分溶解于是少量的蒸餾水中,加入碘片,振搖玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸餾水至規 定量。貯于棕色玻瓶內,緊塞瓶蓋備用。

煌綠水溶液

煌綠 0.5g

蒸餾水 100mL

存放暗處,不少于1d,使其自然滅菌。

牛膽鹽溶液

干燥的牛膽鹽 10g

蒸餾水 100mL

煮沸溶解,121℃高壓滅菌20min。

制備:

基礎液 900mL

硫代硫酸鈉溶液 100mL

碘液 20mL

煌綠溶液 2mL

牛膽鹽溶液 50mL

臨用前,按上列順序,以無菌操作依次加入于基礎液中,每加入一種成分,均應搖勻后再加入另一種成分。分裝于滅菌瓶中,每瓶100mL。

40 亞硒酸鹽胱氨酸增菌液(SC)

成分:

蛋白胨 5g

乳糖 4g

亞硒酸氫鈉 4g

磷酸氫二鈉 5.5g

磷酸二氫鉀 4.58

L-胱氨酸 0.01g

蒸餾水 1000mL

1%L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液的配法:稱取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氫氧化鈉1.5mL,使溶解,再加入蒸餾水8.5mL即成。

制法:將除亞硒酸氫鈉和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸餾水中,加熱煮沸,俟冷備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中,加熱煮沸,候冷,以無菌操作與上液混合。再加入1%L-胱氨酸-氫氧化鈉溶液1mL。分裝于滅菌瓶中,每瓶100mL,pH應為7.0%26plusmn;0.1。

41 GN增菌液

成分:

胰蛋白胨 20g

葡萄糖 1g

甘露醇 2g

檸檬酸鈉 5g

去氧膽酸鈉 0.5g

磷酸氫二鉀 4g

磷酸二氫鉀 1.5g

氯化鈉 5g

蒸餾水 1000mL

pH7.0

制法:按上述成分配好,加熱使溶解,校正pH。分裝每瓶225mL,115℃高壓滅菌15min。

42 腸道菌增菌肉湯

成分:

蛋白胨1 10g

葡萄糖 5g

牛膽鹽 20g

磷酸氫二鈉 8g

磷酸二氫鉀 2g

煌綠 0.015g

蒸餾水 1000mL

pH7.2

制法:按上述成分配好,加熱使溶解,校正pH。分裝每瓶30mL,115℃高壓滅菌15min。

43 亞硫酸鉍瓊脂(BS)

成分:

蛋白胨 10g

牛肉膏 5g

葡萄糖 5g

硫酸亞鐵 0.3g

磷酸氫二鈉 4g

煌綠 0.025g

檸檬酸鉍銨 2g

亞硫酸鈉 6g

瓊脂 18~20g

蒸餾水 1000mL

pH7.5

制法:

1 將前面5種成分溶解于300mL蒸餾水中。

2 將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50mL蒸餾水溶解。

3 將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解,冷至80℃

4 將以上三液合并,補充蒸餾水至1000mL,校正pH,加0.5%煌綠水溶液5mL,搖勻。冷至50~55℃,傾注平皿。

注:此培養基不需高壓滅菌。制備過程不宜過分加熱。以免降低其選擇性。應在臨用前一天制備,貯存于室溫暗處。超過48h不宜使用。

44 DHL瓊脂

成分:

蛋白胨 20g

牛肉膏 3g

乳糖 10g

蔗糖 10g

去氧膽酸鈉 1g

硫代硫酸鈉 2.3g

檸檬酸鈉 1g

檸檬酸鐵銨 1g

中性紅 0.03g

瓊脂 18~20g

蒸餾水 1000mL

pH7.3

制法:將除中性紅和瓊脂以外的成分溶解于400mL蒸餾水中,校正pH。 再將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解,兩液合并,并加入0.5%中性紅水溶液6mL,待冷至50~55℃,傾注平板。

45 HE瓊脂

成分:

脙胨 12g

牛肉膏 3g

乳糖 12g

蔗糖 12g

水楊素 2g

膽鹽 20g

氯化鈉 5g

瓊脂 18~20g

蒸餾水 1000mL

0.4%溴麝香草酚藍溶液 16mL

Andrade指示劑 20mL

甲液 20mL

乙液 20mL

pH7.5

制法:將前面七種成分溶解于400mL蒸餾水內作為基礎液;將瓊脂加入于600mL蒸餾水內,加熱溶解。加入 甲液和乙液于基礎液內,校正pH。再加入指示劑,并與瓊脂液合并,待冷至50~55℃,傾注平板。

注:①此培養基不可高壓滅菌。

②甲液的配制

硫代硫酸鈉 34g

檸檬酸鐵銨 4g

蒸餾水 100mL

②乙液的配制

去氧膽酸鈉 10g

蒸餾水 100mL

②Andrade指示劑

酸性復紅 0.5g

1mol/L氫氧化鈉溶液 16mL

蒸餾水 100mL

將復紅溶解于蒸餾水中,加入氫氧化鈉溶液。數小時后如復紅褪色不全,再加氫氧化鈉溶液1~2mL。

46 SS瓊脂

基礎培養基:

牛肉膏 5g

眎胨 5g

三號膽鹽 3.5g

瓊脂 17g

蒸餾水 1000mL

再將兩液混合,121℃高壓滅菌15min,保存備用。

完全培養基:

基礎培養基 100mL

乳糖 10g

檸檬酸鈉 8.5g

硫代硫酸鈉 8.5g

10%檸檬酸鐵溶液 10mL

1%中性紅溶液 2.5mL

0.1%煌綠溶液 0.33mL

加熱溶化基礎培養基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均勻,校正至pH7.0,加入中性紅和煌綠溶液,傾注平板。

注:①制好的培養基宜當日使用,或保存于冰箱內于48h內使用。

②煌綠溶液配好后應在10d以內使用。

③可以購用SS瓊脂的干燥培養基。

47 WS瓊脂

成分:

②胨 12g

牛肉膏 3g

氯化鈉 5g

乳糖 12g

蔗糖 12g

十二烷基硫酸鈉 2g

瓊脂 15g

Andrade指示劑 20mL

0.4%溴麝香草酚藍溶液 16mL

甲液 20mL

蒸餾水 1000mL

pH7.0

制法:除指示劑和甲液外,將其他成分加熱溶解,不需消毒,校正pH后加入指示劑和甲液,傾注平板應呈草綠色。

注:①供沙門氏菌分離用。

②Andrade指示劑和甲液的配制均見HE瓊脂。

48 麥康凱瓊脂

成分:

蛋白胨 17g

眎胨 3g

豬膽鹽(或牛,羊膽鹽) 5g

氯化鈉 5g

瓊脂 17g

蒸餾水 1000mL

乳糖 10g

0.01%結晶紫水溶液 10mL

0.5%中性紅水溶液 5mL

制法:

1 將蛋白胨,眎,膽鹽和氯化鈉溶解于400mL蒸餾水中,校正pH7.2。將瓊脂加入600mL

加熱溶解。將兩液合并,分裝于燒瓶內,121℃高壓滅菌15min備用。

2 臨用時加熱溶化瓊脂,趁熱加入乳糖,冷至50~55℃時,加入結晶紫和中性紅水溶液,搖勻后傾注平板。

注:結晶紫及中性紅水溶液配好后須經高壓滅菌。

49 伊紅美藍瓊脂(EMB)

成分:

蛋白胨 10g

乳糖 10g

磷酸氫二鉀 2g

瓊脂 17g

2%伊紅Y溶液 20mL

0.65%美藍溶液 10mL

蒸餾水 1000mL

pH7.1

制法:將蛋白胨,磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH,分裝于燒瓶內,121℃高壓滅菌15min備用。臨用時加入乳糖并加熱溶化瓊脂,冷至50~55℃,加入伊紅和美藍溶液,搖勻,傾注平板。

50三糖鐵瓊脂(TSI)

成分:

蛋白胨 20g

牛肉膏 5g

乳糖 10g

蔗糖 10g

葡萄糖 1g

氯化鈉 5g

硫酸亞鐵銨〔Fe(NH4)2(SO4)2?6H2O〕 0.2g

硫代硫酸鈉 0.2g

瓊脂 12g

酚紅 0.025g

蒸餾水 1000mL

pH7.4

制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH。加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5mL,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min。放置高層斜面備用。

51 三糖鐵瓊脂(換用方法)

成分:

蛋白胨 15g

眎胨 5g

牛肉膏 3g

酵母膏 3g

乳糖 10g

蔗糖 10g

葡萄糖 1g

氯化鈉 5g

硫酸亞鐵 0.2g

硫代硫酸鈉 0.3g

瓊脂 12g

酚紅 0.025g

蒸餾水 1000mL

pH7.4

制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH。加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入0。2%酚紅水溶液12。5mL,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層。121℃高壓滅菌15min,放置高層斜面備用。

52 克氏雙糖鐵瓊脂(KI)

上層培養基成分

血消化湯(pH7.6) 500mL

瓊脂 6.5g

硫代硫酸鈉 0.1g

硫酸亞鐵銨 0.1g

乳糖 5g

0.2%酚紅溶液 5mL

下層培養基成分

血消化湯(pH7.6) 500mL

瓊脂 2g

葡萄糖 1g

0.2%酚紅溶液 5mL

制法:

1 取血消化湯按上層和下層的瓊脂用量,分別加入瓊脂,加熱溶解。

2 分別加入其他各種成分。將上層培養基分裝于燒瓶內;將下層培養基分裝于滅菌12mm%26times;100mm試管內,每管約2mL。115℃高壓滅菌10min。

3 將上層培養基放在56℃水浴箱內保溫;將下層培養基直立放在室溫內,使其凝固。

4 當下層培養基凝固后,以無菌手續將上層培養基分裝于下層培養基的上面,每管約1.5mL,放成斜面。

53 克氏雙糖鐵瓊脂(換用方法)

成分:

蛋白胨 20g

牛肉膏 3g

酵母膏 3g

乳糖 10g

葡萄糖 1g

氯化鈉 5g

檸檬酸鐵銨 0.5g

硫代硫酸鈉 0.5g

瓊脂 12g

酚紅 0.025g

蒸餾水 1000mL

pH7.4

制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH。加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂。加入0。2%酚紅水溶液12。5mL,搖勻。分裝試管,裝量宜多些,以便得到比較高的底層。121℃高壓滅菌15min。放置高層斜面備用。

54 葡萄糖半固體發酵管

成分:

蛋白胨 1g

牛肉膏 0.3g

氯化鈉 0.5g

1。6%溴甲酚紫酒精溶液 0.1mL

葡萄糖 1g

瓊脂 0.3g

蒸餾水 100mL

pH7.4

制法:將蛋白胨,牛肉膏和氯化鈉加入于水中,校正pH后加入瓊脂加熱溶解,再加入指示劑和葡萄糖,分裝小試管,滅菌121℃ 15 min。

55 5%乳糖發酵管

成分:

蛋白胨 0.2g

氯化鈉 0.5g

乳糖 5g

2%溴麝香草酚藍水溶液 1.2mL

蒸餾水 100mL

pH7.4

制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸餾水內,校正pH。將乳糖溶解于另外50mL蒸餾水內,分別滅菌121℃ 15min,將兩液混合,以無菌操作分裝于滅菌小試管內。

注:在此培養基內,大部分乳糖遲緩發酵的細菌可于1d內發酵。

56 CAYE培養基

此培養基附在腸毒素診斷試劑盒內,如無此培養基,亦可用Honda氏產毒肉湯。

57 Honda氏產毒肉湯

成分:

水解酪蛋白 20g

酵母浸膏粉 10g

氯化鈉 2.5g

磷酸氫二鈉 15g

葡萄糖 5g

微量元素 0.5mL

蒸餾水 1000mL

pH7.5

制法:溶解后校正pH,高壓滅菌121℃ 15min,待冷至45~50℃時,加入林可霉素溶液,每毫升培養基內含90%26mu;g。

微量元素配方:硫酸鎂 5g,氯化鐵 0.5g,氯化鉆 2g,蒸餾水 100mL

58 Elek氏培養基(毒素測定用)

成分:

胨 20g

麥芽糖 3g

乳糖 0.7g

氯化鈉 5g

瓊脂 15g

40%氫氧化鈉溶液 1.5mL

蒸餾水 1000mL

pH7.8

制法:用500mL蒸餾水溶解瓊脂以外的成分,煮沸,并用濾紙過濾。用1mo1/L氫氧化鈉校正pH。用另外500mL蒸餾水加熱溶解瓊脂。將兩液混合,分裝試管10mL或20mL。121℃高壓滅菌15min。臨用時加熱溶化瓊脂傾注平板。

59 氯化鎂孔雀綠羧芐青霉素培養基

成分:

甲液:胰蛋白胨 10g

蒸餾水 1000mL

乙液:磷酸氫二鈉 9.5g

蒸餾水 1000mL

丙液:氯化鎂(MgCl2%26bull;6H2O) 40g

蒸餾水 400mL

以上分別在121℃滅菌15min。

丁液:孔雀綠 0.2g

蒸餾水 100mL

戊液:羧芐青霉素 1mg/mL

制法:取甲液620mL,乙液160mL,丙液212mL混合,再加入丁液6.4mL和戊液2.4mL,即為1000mL培養基。分裝滅菌燒瓶,每瓶100mL,或滅菌試管10mL。

60 胰蛋白胨水

成分:

胰蛋白胨 10g

蒸餾水 1000mL

pH7.0

制法:將上述成分溶解,校正pH。分裝試管,121℃高壓滅菌15min。

61 Rustigian氏尿素培養液

成分:

尿素 20.0g

酵母浸膏 0.1g

磷酸二氫鉀(KH2PO4) 0.091g

磷酸氫二鈉(Na2HPO4) 0.095g

酚紅 0.01g

蒸餾水 1000mL

制法:將上述成分:于蒸餾水中溶解,校正pH為6.8%26plusmn;0.2。 不要加熱,過濾除菌,無菌分裝于滅菌小試管 中,每管為約3mL。

用途:尿素酶試驗用。

62 氯化鈉結晶紫增菌液

成分:

蛋白胨 20g

氯化鈉 40g

0.01%結晶紫溶液 5mL

蒸餾水 1000mL

pH9.0

制法:

除結晶紫外,其他按上述成分:配好,加熱溶解。約加30%氫氧化鉀溶液4。5mL,校正pH。加熱煮沸,過濾。再加入結晶紫溶液,混合后分裝試管。121℃高壓滅菌15min。

63 氯化鈉蔗糖瓊脂

成分:

蛋白胨 10g

牛肉膏 10g

氯化鈉 50g

蔗糖 10g

瓊脂 18g

0.2%溴麝香草酚藍溶液 20mL

蒸餾水 1000mL

pH7.8

制法:將牛肉膏,蛋白胨及氯化鈉溶解于蒸餾水中,校正pH。加入瓊脂,加熱溶解,過濾。加入指示劑,分裝燒瓶100mL。121℃高壓滅菌15min備用。臨用前在100mL培養基內加入蔗糖1g,加熱溶化并冷至50℃,傾注平板。

64 嗜鹽菌選擇性瓊脂

成分:

蛋白胨 20g

氯化鈉 40g

瓊脂 17g

0.01%結晶紫溶液 5mL

蒸餾水 1000mL

pH8.7

制法:除結晶紫和瓊脂外,其他按上述成分配好,校正pH。加入瓊脂,加熱溶解。再加入結晶紫溶液,分裝燒瓶,每瓶100mL。

65 3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂

成分:

三糖鐵瓊脂 1000mL

氯化鈉 30g

制法:按前面三糖鐵瓊脂,再加入氯化鈉30g,分裝試管,121℃高壓滅菌15min。放置高層斜面備用。

66 氯化鈉血瓊脂

成分:

酵母膏 3g

蛋白胨 10g

氯化鈉 70g

磷酸氫二鈉 5g

甘露醇 10g

結晶紫 0.001g

瓊脂 15g

蒸餾水 1000mL

制法:調pH8.0加熱30min(不必高壓),待冷至45℃左右時,加入新鮮人或兔血(5%~10%)混合均勻,傾注平皿。

67 3.5%氯化鈉生化試驗培養基

成分及制法:根據所需糖的種類按3.2配制。只是將氯化鈉含量改為3.5%,pH為7.7。

68 改良磷酸鹽緩沖液(小腸結腸炎耶爾森氏菌專用)

成分:

磷酸氫二鈉(Na2HPO4 8.23g

磷酸二氫鈉(NaH2PO4?H2O) 1.2g

氯化鈉(NaCl) 5.0g

三號膽鹽 1.5g

山梨醇 20g

制法:將磷酸鹽及氯化鈉溶于蒸餾水中,再加入三號膽鹽及山梨醇,溶解后校正pH為7.6,分裝試管,于121℃高壓滅菌15min,備用。

69 CIN-1培養基

基礎培養基

胰胨 20.0g

酵母浸膏 2.0g

甘露醇 20.0g

氯化鈉 1.0g

去氧膽酸鈉 2.0g

硫酸鎂(MgSO4?7H2O) 0.01g

瓊脂 12.0g

蒸餾水 950mL

pH7.5±0.1

將基礎培養基高壓滅菌。

Irgasan

以95%的乙醇作溶劑,溶解二苯醚,配成0。4%的溶液,待基礎液冷至80℃時,加入1mL混勻。

冷至50℃時,加入:

中性紅(3mg/mL) 10.0mL

結晶紫(0.1mg/mL) 10.0mL

頭孢菌素(1.5mg/mL) 10.0mL

新生霉素(0.25mg/mL) 10.0mL

最后不斷攪拌著加入10.0mL的10%氯化鍶,倒平皿。

70 嗜鹽性試驗培養基

成分:

蛋白胨 2g

氯化鈉 按不同量加

蒸餾水 100mL

pH7.7

制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。每瓶分別加入不同量的氯化鈉:(1)不加;(2)3g;(3)7g;(4)9g;(5)11g。待溶解后分裝試管,121℃高壓滅菌15min



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