結晶紫染色測定細胞數
1． 在 96 孔細胞培養板各孔中加 0.1ml 含 5 × 104 ～ 10 × 4 WEHI-164 細胞的培養液（含 10 ％小牛血清的 RPMI-1640 培養液）， 37 ℃ 5 ％ CO2 的二氧化碳培養箱中培養 2 ～ 3 小時，讓細胞帖壁。
2． 用 RPMI-1640 培養液 10 倍遞次稀釋 TNF 標準品，根據需要 3 ～ 5 倍遞次稀釋待檢樣品，每孔加 0.1ml 稀釋的標準品或待檢樣品，每個稀釋度 3 個重復孔。對照孔 6 個， 3 個陽性對照孔各加 0.1ml 含 4 μ g TNF 的 RPMI-1640 培養液， 3 個陰性對照孔各加 100 μ l RPMI-1640 培養液。繼續培養 18 ～ 24 小時。
3． 甩去培養液，用 PBS 小心洗滌一次，每孔加 0.1ml 10 ％甲醇溶液固定細胞 30 秒鐘。
4． 吸去甲醇溶液，每孔加 0.1ml 結晶紫染液，室溫中放置 20 分鐘。
5． 輕輕甩去染色液，用蒸餾水洗滌各孔，將培養板倒置于吸水紙上吸干水分。自然干燥或 37 ℃烘干。此板可以在室溫中長期保存。
6． 測定前，每孔加 0.1ml 33 ％醋酸脫色，充分振蕩后在 570nm 處測定光吸收度。用光吸收度（ OD ）值對樣品稀釋度作圖，比較標準品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子活性
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