各種感受態細胞的區別 用途 特征

M110或 SCS110

大多數大腸桿菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在CCA/TGC序列的第一個胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都會產生dam,dcm，從而受到甲基化的影響.

部分限制性內切酶對甲基化的DNA不能切割，如FbaI和MboI等，一般生物公司提供的內切酶說明中均有說明。

大多數酶切位點的甲基化不影響切割，而有些會影響，如XbaI, BclI等。而且甲基化只發生在特定序列，以XbaI為例，只有在位點序列旁出現GA或TC，該XbaI位才會被甲基化。

而要解除這種限制修飾作用通常有兩種方法：

（1）選用上述酶的同功酶，如Sau3AI，DNA識別切割位點與MboI相同；但不受甲基化影響；

（2）利用甲基化酶缺失的受體細胞進行DNA的制備，如E.coli JM110和鏈霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者細胞內本就沒有甲基化酶，從這些細胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。

E.coli JM110

要排除dam,dcm甲基化的影響，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110

如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株產生的質粒，則不會被甲基化.

各種感受態細胞的區別 用途 特征

Xl1-Blue菌株

基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。

特點：具有卡那抗性、四環素抗性和氯霉素抗性。

用途：分子克隆和質粒提取。

BL21(DE3)菌株

基因型：F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5])。

特點：該菌株用于以T7 RNA聚合酶為表達系統的高效外源基因的蛋白表達宿主。T7噬菌體RNA聚合酶基因的表達受控于λ噬菌體DE3區的lacUV5啟動子，該區整合于BL21的染色體上。該菌適合于非毒性蛋白的表達。

用途：蛋白質表達。

BL21(DE3)ply菌株

基因型：F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。

特點：該菌株帶有pLysS，具有氯霉素抗性。此質粒還有表達T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾IPTG誘導的表達。 適合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表達。

用途：蛋白質表達

DH5α菌株

基因型：F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, λ–

特點：一種常用于質粒克隆的菌株。 其Φ80dlacZΔM15基因的表達產物與pUC載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現α互補，可用于藍白斑篩選。recA1和 endA1的突變有利于克隆DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。

用途：分子克隆、質粒提取和蛋白質表達。

JM109菌株

基因型：endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proAB) e14- [F‘ traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。

特點：部分抗性缺陷，適合重復基因表達, 可用于M13克隆序列測定和藍白斑篩選。

用途：分子克隆、質粒提取和蛋白質表達。

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