懸浮細胞如何做 transwell 測細胞遷移能力
材料與儀器
細胞樣品、transwell 小室;
步驟
(1)懸浮細胞最好在前一天進行饑餓處理(即無血清培養基過夜培養,以便增強細胞遷移能力);
(2)實驗當天,收集細胞,離心去上清,用無血清培養基重懸,計數;
(3)每組細胞的配制:每組 3 復孔。按照每孔 10^5 個細胞 / 200 μl 的量配制 4 個復孔的用量(多配 1 孔),即 4×10^5 個細胞 / 800 μl;
(4)transwell 下室加入 700-800 μl 的含 10% 胎牛血清的培養基,上室加入(3)中配制好的 100 μl 細胞;
(5)細胞培養箱中培養 24-48 小時,具體需要預實驗摸索下,每種細胞遷移能力不一致;
(6)固定,染色,顯微鏡下拍照,計數,統計。