Brachet反應
原理
細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后，其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應，一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力，且這兩種染料的作用有選擇性，甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色，呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量分析。
材料與儀器
小白鼠
PBS緩沖液 丙酮 二甲苯 乙醇 三氯醋酸 固綠 硫酸銅 聯苯胺混合液 番紅 過碘酸酒精液 Schiff氏酒精液 亞硫酸水 蘇木精 Carnoy固定液
光學顯微鏡 解剖器材 蠟盤 載玻片 吸水紙 染色缸 蓋玻片 水浴箱
步驟
一、方法
1. 接種Hela細胞于蓋片上并培養24~48小時，使長成單層。
2. 取出蓋片，用PBS（pH7.2）輕輕沖洗蓋片表面去除殘渣。
3. 放入Carnoy固定液中固定l小時。
4. 浸入甲基綠-呱咯寧醋酸緩沖液中30分鐘染色。
5. 取出蓋片放入蒸餾水中輕輕漂洗2~3次（2~3秒鐘左右），吸去水分。放入純丙酮中分色2~3秒鐘。
6. 放入1/2丙酮+1/2二甲苯中5秒鐘。
7. 放入純二甲苯中透明5分鐘。
8. 滴一滴中性樹膠于載玻片上，將蓋片標本面朝下封片。
9. 鏡下觀察
二、結果
細胞質被染成淺紅色，細胞核被染成藍綠色，而其中核仁被染成紫紅色。
