細胞內過氧化物酶的顯示

原理

過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯苯胺處理標本，細胞內的過氧化物酶能把聯苯胺氧化為藍色的聯苯胺藍，進而變為棕色產物，因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的有無或多少。

材料與儀器

小白鼠
PBS緩沖液 丙酮 二甲苯 乙醇 三氯醋酸 固綠 硫酸銅 聯苯胺混合液 番紅 過碘酸酒精液 Schiff氏酒精液 亞硫酸水 蘇木精 Carnoy固定液
光學顯微鏡 解剖器材 蠟盤 載玻片 吸水紙 染色缸 蓋玻片 水浴箱

步驟

一、方法

1.  取小鼠一只，以頸椎脫位法將其處死，迅速剖開其后肢暴露出股骨，將股骨一端斜向剪斷，用PBS緩沖液濕潤過的注射器針頭吸出骨髓一滴滴到載玻片上。

2.  推片，室溫晾干。

3.  將涂片放入0.5%硫酸銅中浸30秒~1分鐘。

4.  取出涂片直接放入聯苯胺混合液中反應6分鐘。

5.  清水沖洗，放入1%番紅溶液中復染2分鐘。

6.  清水沖洗，室溫晾干。

7.  鏡檢或封片后鏡檢。

二、結果

涂片中可見一些細胞中存在著藍色或棕色顆粒，為過氧化物酶所在位置。