懸浮培養(yǎng)細胞的融合
材料與儀器
細胞
PEG1000
離心管
步驟
1. 從無血清培養(yǎng)基中沉淀雜交前體細胞。
2. 倒盡上清。
3. 用手指彈撥管底或雙手搓轉離心管，使細胞重新懸浮。
4. 加入 1 ml PEG1000，待 2 分鐘。
5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培養(yǎng)基稀釋 PEG。于室溫，200 g 離心 5 分鐘沉淀細胞。
6. 加 5 ml 含 10% FBS 的培養(yǎng)基，輕輕轉動離心管重懸細胞，盡量不要打碎細胞，按步驟 5 重新沉淀細胞。
7. 最后一次以適量生長培養(yǎng)基重懸細胞，24~48 小時后加入選擇培養(yǎng)基。
8. 篩選細胞：融合 12~24 小時后就可以進行異核體分析。
