單層培養細胞的融合

材料與儀器

細胞
PEG-1000
培養基

步驟

1. 以適當的培養基培養細胞至接近匯合成片的密度（80% 匯合率）。

2. 吸干 60 mm 規格平皿或 T-25 培養瓶中的培養基，加 2 ml 50% PEG-1000，輕輕轉動 1 分鐘讓該粘稠液體覆蓋所有細胞。

3. 往培養皿或瓶中加 5 ml 完全培養基以稀釋 PEG 溶液。

4. 吸凈培養皿或瓶中的液體，再加 5 ml 培養基洗涮細胞，進一步稀釋 PEG。

5. 再洗一次細胞，之后，加 5 ml 新培養基。

6. 細胞放回 37℃ CO2 培養箱，過夜。

7. 恰當地處理細胞：可以消化細胞并重新接種和/或進行生化篩選。

8. 篩選細胞：融合 12~24 小時后就可以進行異核體分析。