赤羽病病毒(AKV)的滴定或純化
材料與儀器
【材料】病毒,靶細胞, 【試劑】瓊脂,中性紅染料 【儀器】顯微鏡
步驟
(1) 于55mm直徑的滅菌塑料培養皿中培養綠猴腎細胞(Vero),使形成單層。 細胞培養 時間約3-4天,接種量約為2 000 000/ml個細胞。選取單層細胞全部覆蓋,不留有空洞的培養皿用作試驗。 (2) 用 細胞培養 液對AKV病毒作10倍倍比稀釋至10-7并保存于4℃。 (3) 每個稀釋度的病毒液接種3個平皿。
注意事項
病毒懸液的滴度以每毫升蝕斑形成單位(PFU/ml)來表示。例如,3個細胞瓶的平均蝕斑是58,接種量為0.2ml,病毒的稀釋度為2.5×103 ,則病毒原液的滴度為: 58÷0.2×2.5×103 =7.25×105 (PFU/ml)。