食用真菌的液體培養
材料與儀器
側耳（ Pleurotus ostreatus 俗稱平菇、北風菌等）
馬鈴薯培養基 玉米粉蔗糖培養基 玉米粉綜合培養基
旋轉式恒溫搖床 接種鏟 接種針 三角瓶
步驟
1. 一種（斜面菌種，俗稱母種。母種斜面移種后稱原種）培養
用無菌接種鏟薄薄鏟下側耳斜面菌絲 1 塊，接種于馬鈴薯培養基斜面中部，26～28℃ 培養 7 d。 食用菌的細胞分裂僅限于菌絲頂端細胞，若用接種環刮下表面菌苔接種，因切斷薄絲，DNA 流失嚴重，大多生長不好。
2. 二級種（搖瓶種子）培養
將上述一級種用無菌接種鏟鏟下約 0.5 cm2 的菌塊至裝有 50 ml 玉米粉蔗糖培養基的 250 ml 三角瓶中，26～28℃ 靜止培養 2 d，再置旋轉式搖床，同樣溫度，150～180 r／min，培養 3 d。靜止培養，促使鏟斷菌絲的愈合，有利于繁殖，大規模菌絲生產，一般都進行二級搖瓶神子培養。
若系作為固體栽培的種子，則在菌絲球數量達到最高峰時（3 d 左右），放入 10 顆左右滅菌玻璃珠，適度旋轉揺動 5 min、10 min 均質菌絲，將這種均質化的菌絲片斷懸液作為接種物（或用勻漿器，均質一定時間）。取 1 ml 涂布在酵母裔麥芽汁瓊臘平板上，重復 3 份，置 28℃ 培養 3 d 后計算菌落數作為菌絲斷片成活試驗。
用搖瓶種子可以直接作固體栽培種，而用均質菌絲懸浮液作栽培種，發育點多、接種效果好。也可以成熟的播瓶種子接種處理好的麥粒，制成液體一麥粒栽培種，細胞年舲一致，老化菌絲少，用作栽培種，則生產時間縮短，污染率低，可増產 5％～25％。
1.3 發酵培養
上述搖瓶種子無雜菌污染即可分別以10％ 接神量接入 3 個玉米粉綜合培養基中（50 ml／250 ml 三角瓶），25～28℃ 培養 3～4 d。從第一天起至結束，每天取已知重量的干燥小離心管 3 個，分別重復取樣 2.0 ml，4000 r／min 10 min，棄上淸 60～62℃ 24 h 干燥稱恒重。
發酵液由稠變稀，菌絲略有自溶即應暫停培養。發酵液經過不同處理，制成備種用途。
