大分子物質的水解實驗-淀粉水解試驗
原理
淀粉酶水解淀粉為小分子的糊精、雙糖和單糖的過程可通過觀察細菌菌落周圍的物質變化來證實:淀粉遇碘液會產生藍色,但細菌水解淀粉的區域,用碘測定不再產生藍色,表明細菌產生淀粉酶酶。
材料與儀器
枯草芽孢桿菌 大腸桿菌 金黃色葡萄球菌 銅綠假單胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)
固體淀粉培養基 革蘭氏染色用盧戈氏碘液(Lugol's iodine solution)
無菌平皿 接種環和接種針
步驟
1. 將固體淀粉培養基溶化后冷至 50℃ 左右,無菌操作制成平板。
2. 用記號筆在平板底部劃成四部分。
3. 將枯草芽孢桿菌,大腸桿菌,金黃色葡萄球菌,銅綠假單胞菌分別在不同的部分劃線接種,在平板的反面分別在四部分寫上菌名。
4. 將平板倒置在 37℃ 溫室中培養 24 小時。
5. 觀察各種細菌的生長情況,將平板打開蓋子,滴入少量 Lugol's 碘液于平皿中,輕輕旋轉平板,使碘液均勻鋪滿整個平板。
如菌苔周圍出現無色透明圈,說明淀粉已被水解,為陽性,透明圈的大小可初步判斷該菌水解淀粉能力的強弱,即產生胞外淀粉酶活力的高低。