高效液相色譜原理和操作詳解

色譜法的分離原理是：溶于流動相（mobile phase）中的各組分經過固定相時，由于與固定相（stationary phase）發生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出；又稱為色層法、層析法。

色譜法最早是由俄國植物學家茨維特（Tswett）在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時發現的，色譜法（Chromatography）因之得名；后來在此基礎上發展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。

液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經典液相色譜法，此方法柱效低、時間長（常有幾個小時）。高效液相色譜法（High performance Liquid Chromatography，HPLC）是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。它與經典液相色譜法的區別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動相，故又稱高壓液相色譜法（High Pressure Liquid Chromatography，HPLC）。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法（High Speed Liquid Chromatography，HSLP）；也稱現代液相色譜。

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