島津LC2010A/C型高效液相色譜儀操作規程
1 儀器組成與開機
1.1 本儀器由Class-VP工作站、在線脫氣機、輸液泵、自動進樣器、柱溫箱和檢測器等部件組成。各部分的操作均可由工作站或液晶面板控制完成。
1.2 分別打開計算機、LC-2010A/C高效液相色譜儀的電源開關。
1.3 儀器約需3min時間完成自檢過程,此時雙擊【Class-VP】快捷方式圖標后,雙擊【Instrument l】可進入聯機狀態;雙擊【Offline Processing】可進入脫機狀態(聯機狀態下可實現計算機對儀器的操縱控制以及在線據的采集和分析;脫機狀態下可實現已采集數據的處理和再分析)。
1.4 在聯機狀態下,計算機屏幕顯示Class-VP 6.12工作站畫面,此時得用工具欄上的【Auto Purge】按鈕對儀器管路進行徹底的沖洗并排除可能存在的氣泡,【Auto Purge】功能將按照操作者的設置自動進行和停止(本機為四元低壓梯度系統,分為A、B、C、D、R五個流路并配有五路在線脫氣機。其中R流路為自動進樣器的清洗流路。在進行Purge時,可以只選擇所需要的流路進行Purge,但第R路是必選項)。
2 分析方法的建立、存儲和調用
2.1 分析方法的建立
2.1.1 單擊菜單欄中的【File→Method→New】以便建立一種新方法。
2.1.2 此時【LC Setup Assistant-System】對話框將顯示當前的分析方法名為Untitled.met,單擊【Simple Setting】可進行常規分析條件的設定;單擊【Method→Instrument Setup】可進行復雜分析條件的設定。
2.1.3 利用【Simple Setting】進行常規分析條件的設定在Mode中選擇“Low Prerrure Gradient”;在Pump框中設定流速、各流路(通道)的比例、最大最小壓力限;在【Oven】框中設定柱溫;確保【Detector A】復選項被選中后,在其中設定所需的檢測波長;在【Time Program】中設定液相停止時間以及采集停止時間(一般情況下二者一致。可選擇【LC Stop】時間后,單擊【Apply to All Aequisition Time】按鈕使二者一致)。
單擊【Download】按鈕,使所設定的分析條件成為當前分析方法(每當完成一種新的設定后,一般均應執行此步驟,后不贅述)。此時,若儀器的系統控制器沒有打開,可單擊工具欄上的【Instrument On/Off】按鈕,儀器將按照所設定的條件開始進行。
2.1.4 利用【Method】→【Instrument Setup】進行復雜分析條件的設定該部分中可對泵、柱溫、檢測器、系統控制器、時間程序等組件或程序進行更進一步的設定和控制。如:設定檢測器的靈敏度、D2燈的開關、梯度洗脫程序的設定等。
2.1.5 峰/組表(Peak/Group Tables)的設定
2.1.5.1 打開校準用標準物質的色譜文件,點擊積分事件工具欄中的【Define Peaks】按鈕,按狀態欄的提示進行操作,將要校準的峰(此處即為校準用標準物質峰)的保留時間及保留時間窗口添加到峰表中。
2.1.5.2 選擇【Method】→【Peak/Group Tables】打開峰表。在峰表中輸入要校準的峰的相關信息,其中【ID】、【Ret Time】Window已自動添加,其他需要輸入的內容為:【Name】(組分峰的名稱)、【ISTD ID#】(內標峰的ID號)、【Units】(報告結果的濃度單位)、【Analysis Channel】(選擇所用的檢測通道)、【Fit Type】(選擇標準曲線的類型,如點到點、線性、二次曲線等方式)、【Zero】(選擇后強制校準曲線通過零點)、【Calib Flag】(選擇Weight Average)、【Level 1~10】(輸入各組分中每份校準用標準用標準物質的量及其內標物質的量)等。
2.2 分析方法的存儲
分析方法建立后應及時利用菜單欄中的【File→Method→Save(Save As)】或單擊常用工具欄中的保存按鈕進行存儲。分析方法一般建議存儲在C:\Class-VP\Methods中或其他個人文件夾中(無論新建還是調用一種方法,在對方法本身做了任何的設定或改動后均應隨時點擊常用工具欄中的保存按鈕,以防信息丟失!后不贅述)。
2.3 分析方法的調用
如果想調用一種已存的分析方法,單擊菜單欄中的【File→Method→Open】后,選中所需的分析方法并單擊“打開”。此時,【LC Setup Assistant-System】對話框中將顯示所打開的分析方法名,其中操作同2.1。
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