BMDC 提取與培養需要注意的事項?
1. 小鼠品系和性別:目前培養 BMDC 用的比較多的小鼠是雌性或雄性 C57BL/6 小鼠。
2. 單獨使用 GM-CSF 還是聯合使用 IL-4?
GM-CSF+IL-4 聯合誘導的 BMDC 的成熟度高于 GM-CSF 單獨誘導的 BMDC。
3. 成熟誘導劑的選擇:
LPS 和 CD40L 均是 DC 體外完全成熟的強誘導劑,CD40L 誘導成熟的 BMDC 在體內顯示出最強的免疫調節能力,最好能用重組的 CD40L 三聚體蛋白來刺激 DC;用 LPS 刺激 DC 完全成熟所用的濃度一般為 1-10 g/ml。
4. 培養方法的選擇:
最常用的三種 BMDC 培養方法,Inaba 經典法和 Lutz 法和 son 法,根據需要選擇。