在液體培養基中形成孢子
材料與儀器
培養基
步驟
1)在合適的培養容器中,加入YPD培養基培養,待形成孢子的二倍體細胞生長至 OD600為 2.5?3.0 (約為 8×107 細胞/mL)。
2)轉移1 mL培養液至一支無菌15 mL聚丙烯試管中,1200 g離心5 min。
3)倒去上清,用5 mL無菌水重懸細胞,渦旋振蕩使細胞充分懸浮,再按步驟2離心。
4)倒去上清,細胞用1 mL添加了特定二倍體細胞所需營養成分的孢子形成液體培養基懸浮。
5)于30℃,350 r/min以上轉速培養2?3天,在顯微鏡下檢査孢子的形成。
如果酵母菌株難以誘導形成孢子,用YPA培養基預培養細胞。用乙酸作碳源時,酵母菌需要呼吸,而呼吸作用是孢子形成所必需的。