PromoCell心肌細胞

PromoCell的人類心肌細胞的來源

PromoCell的人類心肌細胞（HCM）分離自成人心臟的心室，該組織來源于正在進行心臟移植的患者的外植心臟。

a）當一個大樣本的心肌進行了灌注和不完全消化時，會分離得到的桿狀的心肌細胞。其中一些細胞會自發進行常規的收縮，而其它一些只有受到刺激時才會收縮。由于其收縮功能，它們通常能用于生理研究。然而，有規律的肌節排布，會阻止大多數的細胞附著到TC培養皿上，因此，它們在體外是無法生長的。

b）而另外一種情況下，當成人心肌進行的是完全消化，則可以分離和培養到一些沒有肌節的細胞。這i細胞是球形的，容易附著到培養皿中并且增殖。雖然他們不具備自發性收縮的能力，但是它們具有正常的心肌細胞在體外的許多特點。

PromoCell HCM提供的就是這些球形細胞。這種細胞經證實具有類似祖細胞的分化能力。但是，到現在為止，還沒有操作方案可以誘導我們的HCM的收縮活動。
應用領域：心臟研究，藥理研究

培養中的人類心肌細胞HCM的形態

在體外培,根據細胞培養密度的不同，HCM表現出兩種不同的顯著形態特征。當細胞以較低密度培養時,HCM會長得比較肥，細胞延展性差，顯得比較短（如圖1a）。當細胞密度逐漸增加時，心肌細胞則呈現第二種形態。心肌細胞開始細，拉長并開始在彼此上層生長而形成團塊（如圖1b）。在這些團塊之間，稍肥大的細胞平行排列。

適用于HCM的體外生是培養墓

PromoCell為HCM的生長和增殖開發了一種專門的培,基。
PromoCell的心肌細胞生長培,基所含血清濃度很低（5%V /V），并添加有優選的激素和生長因子。

培養墓的質量控制

PromoCell每一批次的人類心肌細胞都進行嚴格的質量控制檢驗。HCM的檢測參數包括細胞形態，貼壁率和細胞活性。此外，使用流式細胞儀分析心肌細胞特異的標記物。另外，在各個倍增數階段都進行生長性能測試，一直進行檢測到15個倍增數以上。

PromoCell HCM的指控指標

活性
■檢測活細胞的比率
■保證每一支凍存管中的活細胞數>500,000

生長性能測試
■測定對數生長期的倍增時間
■檢驗各支細胞能培養到15個倍增數以上

表型特征
■通過流式細胞儀檢測細胞類型特異性的標記物

HCM的體外培養過程

PromoCell為HCM的生長和增殖開發了一種專門的培,基。 PromoCell的心肌細胞生長培,基所含血清濃3很低（5%V/V），并添加有優選的激素和生長因子。

在PromoCell的HCM的長期體外培養過程中，分化階段的各個不同標記物的表達情況會有變化。隨著HCM培養時間的進一步延長，則稍晚期分化階段的一i標記物的表達呈陽性，并且有20%以上的HCM對最終分化階段的標記物呈現陽性。

當生長到一定密度時，PromoCell的HCM開始分化，并在一段時間以后達到最終的分化狀態。分化過程可以通過長期培養后的形態學改以及各階段特異性的標記物的出現而得到證實。

PromoCell的HCM的形態隨著時間而改變。肌管狀的結構是分化狀態的心肌細胞的典型標記物，可以在培養的一開始就被檢測到。之后，隨著細胞密度逐漸增大，肌管開始形成分支狀結構。這些分支狀的結構是最終分化狀態的心肌細胞的典型形態特征。

結果中的結論可以由對PromoCell培養,過程h45-間點的分化標記物的分析來證%。當觀察到肌管樣構時，就會檢測c后期分化階段的標記物。隨著培養時間的延長，呈現出后期分化狀態的HCM數量增加，并且開始有20%以上的HCM表達最終分化狀態的一些特異性標記物。在這些時間點，PromoCell的HCM開始形成分支狀結構。

體外培養的PromoCell的HCM特點:

■增殖h的HCM處于較早期的分化階段。