原代細胞計數技術
原代細胞計數技術:
1、準備計數板:用酒精清潔計數板及專用蓋玻片,然后輕輕拭干。
2、制備細胞懸液:用消化液分散單層培養細胞或直接收集懸浮培養細胞,制成單個細胞懸液。要求細胞密度不低于104/ml,胞數很少,應將懸液離心(1000rpm,2分鐘),重懸浮于少量培養液中。
3、加樣:用習慣輕吹打細胞懸液,取少許細胞懸液,在計數板上蓋玻片的一側加微量細胞懸液。
4、計數:計算計數板四大格細胞總數,壓線細胞只計左側和上方的。然后按下式計算:
細胞數/ml=4大格細胞總數/ 4×10000。
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