小鼠單核巨噬細胞RAW264.7的消化及傳代

RAW264.7因是單核巨噬細胞其生物學特性就是貼壁特別牢，普通的方法根本就不可能將它消化下來，這也是養這種細胞最頭痛的問題。現將我的一點心得，簡介如下：

消化液：0.5％胰酶、0.2％EDTA，實驗前加溫到37度

以50ml培養瓶為例：

1、細胞貼壁生長，長滿瓶底80％時，棄去培養液，加D-HANKS 漂洗 兩次；

2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1－2ml,消化37℃約2-5min，鏡下可見細胞基本圓形回縮即中止消化，棄消化液加D-HANKS 漂洗兩次；

3、加入新培養液10ml復吹打混懸細胞，按需要分入 新的培養瓶；

4 、入37℃5％CO2孵箱，幾小時后即可再貼壁 。

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