HepG2 細胞傳代
大多數朋友說推薦培養液為DMEM加10%胎牛血清,1%谷氨酰胺,我們這里用1640加10%新生牛血清,效果也不錯。
DMEM不容易觀察,有時候等DMEM黃了的時候,細胞已經嚴重缺乏養料,1640顏色變化比較明顯,也比較符合細胞當時的情況。
細胞置于5%CO2、37度培養,細胞生長較快,根據你留在瓶里細胞的數量,50%兩天后傳代一次。
0.25%胰酶+0.01%EDTA消化,該細胞容易抱團,我是一般先用胰酶洗一下,然后加胰酶37度,觀察細胞形態變化,細胞變圓時,倒掉胰酶,加入培養液,吹打重懸。如果要鋪板子進行相關實驗,一般離心,500r/10min。
細胞消化一般是變圓以后我們終止消化,不是等細胞間隙一縮小就加培養液,細胞消化的充分一些,吹打得時候對細胞損傷小一些。
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