API 50 CH是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的微生物生化鑒定系統(tǒng)，含49種碳源代謝實(shí)驗(yàn)。鑒定乳酸桿菌及其相關(guān)細(xì)菌采用API 50 CHL 培養(yǎng)基進(jìn)行菌株培養(yǎng)；鑒定芽孢桿菌及相關(guān)細(xì)菌，腸桿菌科細(xì)菌和弧菌科細(xì)菌等類(lèi)群則采用API 50 CHB 培養(yǎng)基。檢驗(yàn)原理：
API 50 CH試條由50個(gè)微量孔組成，檢測(cè)微生物對(duì)不同碳水化合物及其衍生物底物的發(fā)酵。其原理為：試條培養(yǎng)過(guò)程中糖發(fā)酵產(chǎn)酸，pH改變而使培養(yǎng)基中指示劑顏色變化。試條上第一孔中不含任何活性成分，以此作為陰性對(duì)照。檢驗(yàn)方法：
1. 試劑條的準(zhǔn)備
每條試條分別由5個(gè)小試條組成，每個(gè)小試條上有10個(gè)小管。準(zhǔn)備孵育盒（包括底盤(pán)和蓋子)，在盒子底盤(pán)一端的加長(zhǎng)部分記錄菌株的編號(hào)， 加10 mL蒸餾水或去離子水于孵育盒底盤(pán)中，使其填滿(mǎn)所有的孔，以保持濕潤(rùn)的氣體環(huán)境。2. 接種物的制備
在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上接種細(xì)菌使其生長(zhǎng)，確認(rèn)菌株為純培養(yǎng)物。使用棉試子從固體培養(yǎng)基上收集菌株，在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中制備接種物，菌懸液制備好后，應(yīng)立即使用。3. 試劑條的接種
用無(wú)菌加樣器按要求將菌懸液加到試條上的50個(gè)管中，當(dāng)菌懸液接種完成后，液面應(yīng)避免出現(xiàn)新月形的凹陷或凸起。注：加礦物油可根據(jù)需要選擇，但對(duì)嚴(yán)格好氧菌不推薦使用。根據(jù)被檢細(xì)菌的生長(zhǎng)需要，將試條放在適當(dāng)?shù)臏囟冗M(jìn)行培養(yǎng)，記錄結(jié)果。檢驗(yàn)結(jié)果的解釋?zhuān)?/span>
1. 讀取試劑條
根據(jù)細(xì)菌和所研究反應(yīng)的類(lèi)型，在達(dá)到了規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間后(如24小時(shí)，48 小時(shí))，閱讀試劑條。2. 判讀
以陽(yáng)性(+)，陰性 (-)，可疑(?)來(lái)解釋每一個(gè)試驗(yàn)，將結(jié)果記錄在結(jié)果記錄單上。結(jié)果可產(chǎn)生生化反應(yīng)譜，將其輸入到乳酸桿菌、芽孢桿菌及其相關(guān)細(xì)菌，或腸桿菌科細(xì)菌和弧菌科細(xì)菌的鑒定軟件中，即可得到鑒定結(jié)果。
