白細(xì)胞分類計數(shù)實(shí)驗

原理

把血液制成細(xì)胞分布均勻的薄膜涂片，用復(fù)合染料染色，根據(jù)各類白細(xì)胞形態(tài)特征予以分類計數(shù)，得出相對比值（百分率），經(jīng)觀察數(shù)量、形態(tài)和質(zhì)量的變化，對疾病有輔助診斷意義。

材料與儀器

推玻片一塊 干凈玻片數(shù)塊 消毒針頭 75%酒精棉球 蠟筆 擦鏡紙 顯微鏡 瑞氏染液 蒸餾水 顯微鏡油 二甲苯

步驟

一、 血涂片制作

1. 以75%酒精棉球消毒指頭，用消毒針頭刺進(jìn)局部，先拭去第一滴血，然后取血一小滴（米粒大小）置于干凈玻片上的一端。

2. 用干凈推玻片的一端放在血滴前方，將推玻片略向后移，使與血滴相接觸，讓血滴在推片與載玻片的夾角間平均散開后，用30-45度角不加壓力，平穩(wěn)地推至另一端制成均勻的血膜薄片（見圖41）。

3. 血片涼干后，滴上瑞氏染液，使蓋滿整個血膜片，大約半分鐘后再加一倍蒸餾水，輕輕搖動玻片，待5-10分鐘后，用凈水緩緩地沖去玻片上的染液，沖洗時應(yīng)將玻片持平，使染液自玻片邊緣溢出，以免沉淀物附于血膜上影響觀察結(jié)果辯認(rèn)。晾干后分類。

二、分類計數(shù)

1. 把染好涼干的血片，先在低倍鏡下觀察細(xì)胞染色及分布情況，然后用油鏡分類，分類時要按一定順序進(jìn)行（圖42）。

2. 將所見到的細(xì)胞分別記下，至總數(shù)100個為止，計算各類細(xì)胞所占的百分?jǐn)?shù)。

參考值

細(xì)胞類別                    成人

中性粒細(xì)胞

桿狀核               0.01-0.05（1％-5％）

分葉核               0.50-0.70（50％-70％）

嗜酸性粒細(xì)胞             0.005-0.05（0.5％-5％）

嗜堿性粒細(xì)胞             0-0.01（0％-1％）

淋 巴 細(xì) 胞              0.20-0.40（20％-40％）

單 核 細(xì) 胞              0.03-0.08（3％-8％）

注意事項

1．要避免重復(fù)計數(shù)，玻片應(yīng)由血膜邊緣向中央依次上下曲線移動。

2. 白細(xì)胞總數(shù)超過20×109/L，應(yīng)分類計數(shù)200個細(xì)胞。白細(xì)胞數(shù)明顯減少的血片，可檢查多張血片。

常見問題

臨床意義
1. 增多
(1) 中性粒細(xì)胞：急性化膿感染，粒細(xì)胞白血病，急性出血，溶血，手術(shù)后，尿毒癥，酸中毒，急性汞中毒，急性鉛中毒等。

(2) 嗜酸性粒細(xì)胞：變態(tài)反應(yīng)，寄生蟲病，某些皮膚病，某些血液病，手術(shù)后，燒傷等。

嗜堿性粒細(xì)胞：慢性粒細(xì)胞白血病，何杰金病，癌轉(zhuǎn)移，鉍中毒等。

(3)  淋巴細(xì)胞：百日咳，傳染性單核細(xì)胞增多癥，慢性淋巴細(xì)胞白血病，麻疹，腮腺炎，結(jié)核，傳染性肝炎等。

（4） 單核細(xì)胞：結(jié)核，傷寒，亞急性感染性心內(nèi)膜炎，瘧疾，黑熱病，單核細(xì)胞白血病，急性傳染病的恢復(fù)期等。

2. 減少
（1）中性粒細(xì)胞：傷寒，副傷寒，瘧疾，流感，化學(xué)藥物中毒，X線和鐳照射，抗癌藥物化療，極度嚴(yán)重感染，再障，粒細(xì)胞缺乏等。

（2）嗜酸性粒細(xì)胞：傷寒，副傷寒以及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素后。

（3）淋巴細(xì)胞：多見于傳染病急性期，放射病，細(xì)胞免疫缺陷等.