細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)及細(xì)胞核內(nèi)抗原檢測的染色方案

材料與儀器

單抗 細(xì)胞
PBS NaN3 FBS

步驟

1. 在試管中加入染膜外抗原單抗或陰性對照，在每一試管中加入大約 1x106 個細(xì)胞?；靹蚝?，避光孵育 15 min。

2. 再加入 100 ul 的試劑，避光孵育 15 min。

3. 用 3 ml PBS+0.1% NaN3+5%FBS 洗滌 1 次，1500 r/min 離心 5 min，去上清。

4. 加入 100 ul 和相應(yīng)的膜內(nèi)標(biāo)記抗體或陰性對照。

5. 混勻后，在 2~8℃ 下孵育 20 min。3 ml PBS+0.1% NaN3+5% FBS 洗滌 1 次。

6. 1500 r/min 離心 5 min，去上清，用 0.5 ml PBS+0.1% NaN3+5%FBS 重新懸浮。

7. 上機(jī)分析。