尿液脫落細(xì)胞的單細(xì)胞懸液的制備
原理
在臨床工作中,可以收集到大量自然脫落細(xì)胞,這些細(xì)胞標(biāo)本經(jīng)過簡單處理,便可成為較好的單細(xì)胞懸液供流式細(xì)胞術(shù)分析。主要包括脫落細(xì)胞、胸腹水細(xì)胞、尿液、內(nèi)鏡刷檢細(xì)胞等。
材料與儀器
尿液
生理鹽水
尼龍網(wǎng)
步驟
1. 用一清潔器皿收集 24 h 尿液,置 4℃ 冰箱中自然沉淀 2 h,輕輕倒去上清液,留下少許帶細(xì)胞的沉淀物,用吸管移至 10~20 ml 離心管中。
2. 500 r/min 離心 10 min,去上清。
3. 加 PBS 液 8~10 ml,以 1000 r/min 離心 10 min,去上清;重復(fù)再洗 1 次。
4. 再加 5 ml PBS 液混勻,用 300 目尼龍濾網(wǎng)過濾,離心沉淀去上清。
5. 再加少許 PBS 液,混勻。加固定液或低溫保存,備用。