HePG2細胞和L-02細胞的傳代經驗
HePG2細胞屬人肝腫瘤的恒生細胞株,L-02細胞則是人胎肝細胞株,二者所使用的培養(yǎng)基可以是一樣的,即最常見的DMEM。一干使用低糖的。
細胞長滿培養(yǎng)瓶時既要傳代。使用胰酶消化即可。用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶。使用前37度預熱,細胞經PBS清洗兩遍后,每個中號培養(yǎng)瓶加0.7ml的胰酶,胰酶的量可根據自己培養(yǎng)瓶的大小而定,原則就是能夠蓋滿瓶底。加入胰酶以后,為使酶的活性最大,將培養(yǎng)瓶蓋擰緊后放回培養(yǎng)箱中,3分鐘左右即用含血清的培養(yǎng)基終止消化。如果在室溫情況下消化,時間相應加長,可以在顯微鏡下觀察,當細胞界限已十分清楚,即已分離為單個細胞,且有少量細胞漂起,則要終止消化了。
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