細(xì)胞傳代方法

貼壁生長細(xì)胞傳代——采用酶消化法傳代。常用的消化液是0.25%胰蛋白酶液。

1、將長成單層的細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液（以液面蓋住細(xì)胞為宜）（我常加1ml），靜置5~10分鐘。

2、在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。

3、將細(xì)胞懸液吸出2ml左右，加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。

4、傳代細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果

一般情況，傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。

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