新鮮實(shí)體組織樣本的制備（機(jī)械法）-剪碎法

原理

機(jī)械法分散實(shí)體組織。用手術(shù)剪刀剪碎組織、用鋒利的解剖刀剁碎組織或用勻漿器制成組織勻漿，再用細(xì)注射針頭抽吸細(xì)胞或用 300 日尼龍網(wǎng)濾出單細(xì)胞懸液；采用網(wǎng)搓法也能獲得大量細(xì)胞。機(jī)械法易造成細(xì)胞碎片和細(xì)胞團(tuán)塊，所以常與其他方法配合使用。

材料與儀器

組織 酶
生理鹽水
剪刀 尼龍網(wǎng)

步驟

1. 將組織塊放入平皿中，加入少量生理鹽水。

2. 用剪刀將組織剪至勻漿狀。

3. 加入 10 ml 生理鹽水。

4. 用吸管吸取組織勻漿，先以 100 目尼龍網(wǎng)過濾到試管中。

5. 離心沉淀 1000 r/min，4~5 min，再用生理鹽水洗 3 遍，每次以低速（500~800 min）短時(shí)離心沉淀去除細(xì)胞碎片。

6. 以 300 目尼龍網(wǎng)濾去細(xì)胞團(tuán)塊。

7. 細(xì)胞用固定液固定或低溫保存?zhèn)溆谩?/span>