細胞蛋白質總量樣品的制備及分析

步驟

取 20 mg 異硫氰酸熒光素，加 20 ml 無水乙醇，使 FITC 充分溶解，即為染色液的原液，保存于 4℃ 冰箱待用。具體熒光染色步驟如下：

1. FITC 貯存液的稀釋：用 pH 7.4 的 PBS 液稀釋成 50 ug/ml 濃度的工作液，備用。

2. 被染色細胞首先用 70% 酒精破膜，作用 10 min，使 FITC 染料能進入到細胞中。

3. 用離心法以 PBS 液洗去破膜劑，離心收集細胞。

4. 再取 FITC 工作液 2 ml 加入樣品中，混勻，置 4℃ 冰箱中反應 30 min。

5. 用 PBS 液以 1500 r/min 離心 5 min，洗去染色液，再離心去上清。

6. 再加 0.5 ml PBS，混勻，上機檢測。