偶聯了抗PECAM抗體的磁珠篩選細胞
材料與儀器
PBS FCS
磁珠 T25 板
步驟
1. 向“分離樣品的制備”步驟10的細胞樣品中加入 30 μl 偶聯了抗 PECAM 抗體的磁珠。
2. 細胞和磁珠混合物冰上保溫 15 分鐘。
3. 磁體置于管側 5 分鐘，吸引篩選樣品向磁體移動。小心吸棄上清，移開磁體。
4. 向磁珠中加 2 ml PBS/FCS，輕輕混勻，確保沒有大的團塊。用磁體重復篩選。
5. 重復步驟3和4三次。
6. 磁粒懸于 1 ml 接種培養基中。
7. 重懸細胞接種明膠包被的 T25 板，每 10 g 脂肪組織分離的細胞接種一塊 T25 板。37℃ 振動培養。
8. 細胞長至足夠密度時傳代，在最初的兩次傳代中要應用篩選程序，確保內皮細胞純度。
