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胰酶消化法原理將大鼠的肺成纖維細胞從機體中取出，經(jīng)胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的生長培養(yǎng)基培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞得以生存、生長和繁殖。材料與儀器Wistar乳鼠PBS牛血清青霉素鏈霉...

Caspase-3活性檢測法原理Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中caspase-3為關鍵的執(zhí)行分子，它在凋亡信號傳導的許多途徑中發(fā)揮功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞漿中，在凋...

TUNEL法原理脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了報告酶（過氧化物酶或堿性磷酸...

磷脂酰絲氨酸外翻分析（AnnexinV法）原理磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine,PS）正常位于細胞膜的內(nèi)側，但在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內(nèi)側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環(huán)境中(圖3)。Annexin-V是...

AnnexinV/PI雙染色法原理細胞凋亡早期改變發(fā)生在細胞膜表面，目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸（PS）從細胞膜內(nèi)轉移到細胞膜外，使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的...

DNAladder法原理發(fā)生細胞凋亡時，內(nèi)源性核酸酶被激活，染色體DNA鏈在核小體之間被切割，形成180～200個堿基或其整數(shù)倍的DNA片段，將這些DNA片段抽提出來進行電泳，可得到DNA梯狀條帶（DNAladder）...

形態(tài)學檢測法原理根據(jù)凋亡細胞固有的形態(tài)特征，使用合適的顯微鏡檢測凋亡細胞形態(tài)變化。材料與儀器Hela細胞Jurkat細胞DAPIHoechst蒸餾水PBS光學顯微鏡倒置顯微鏡透射電子顯微鏡熒光顯微鏡共聚焦激光掃描顯...

熒光探針雙標記法原理本實驗用1μg/ml三尖杉酯堿HT在體外誘導培養(yǎng)的HL-60細胞發(fā)生凋亡，同時也有少數(shù)細胞發(fā)生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidiumiodide，PI）對細胞進行雙重染色，可以區(qū)別凋亡、壞死...