乳鼠心肌細胞培養經驗

1、如果細胞狀態不好，可能是消化或者培養基的原因，細胞胞漿會出現空泡，一旦出現過多，細胞基本不能用。

2、心肌細胞不能傳代。

3、心肌細胞有聚集生長的特性，培養時間長點，一般超過4天后，細胞會聚集成小島狀，以小島為中心搏動，當然有小島說明細胞密度較小。

4、心肌細胞的狀態與細胞密度有很大關系，一般細胞密度越大，心肌細胞相對來說越容易長好，達到同步搏動的時間也快。

5、心肌細胞同步搏動不難達到，基本上消化培養的過程合理一點，密度大一點，密度小的時候24小時換液時就能見到個別細胞搏動，密度大的時候偶爾能見到同步搏動，48小時基本能看到同步搏動。

6、心肌細胞既然有聚集生長的特性，所以容易粘附在一起，那些狀態不好或沒貼壁的細胞會粘附在貼壁細胞上面，導致細胞圖片不好看，尤其是細胞爬片，拍照時受很大影響。但這種情況一旦換液會改善很多。尤其是細胞狀態好的時候，換液時稍微吹打，洗2次左右，整個視野會干凈而且明亮，當然這和細胞狀態有很大關系，狀態不好，怎么洗都沒用。

7、心肌細胞形態各異，48小時內基本從圓形---條狀，但厚實---多邊形，一般三邊或四邊---慢慢的會有突起，類似軸突產生，這時細胞容易聚集成島狀，細胞邊界不是很明顯。而且如果細胞不純，經常有成纖維細胞，會對心肌細胞的形態，邊界判斷造成很大不便。

8、心肌細胞的純化不容易，問題最大的是成纖維細胞，一般來說個人感覺無法完全去除，而且純化過程多少對心肌細胞也有損傷，如差速貼壁，加5溴鳥苷等。

9、心肌細胞培養有時會產生一些黑點，眾說紛紜，換液后會改善。

10、心肌細胞培養總的來說條件比較難確定，養成不難，養好不易。需要注意每個細節，個人認為細胞狀態的重復性很差。

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