薄層層析實(shí)驗(yàn)薄層板的制備經(jīng)驗(yàn)總結(jié)
薄層板的制備總結(jié)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)
1.CMC-Na配置也比較重要,不能太稀了,不然硅膠的黏附性不好,鋪好的硅膠容易脫落.太稠了也不行,不容易和硅膠混勻
2.CMC-Na與硅膠混合時(shí)注意比例,一般為30克硅膠加入100克0.3-0.5%的CMC-Na水溶液.如果鋪多了的話可以憑經(jīng)驗(yàn)就能感覺到適合的程度.混合時(shí)最好朝一個(gè)方向研,這樣也不容易有氣泡
3.鋪板的均勻.這也是關(guān)系到板好壞的重要方面.為了使薄層板硅膠均勻,鋪好后將玻璃板放在桌邊小心上下顛動(dòng),保證薄層板所有地方都一樣均勻.
4.鋪板的厚度,個(gè)人所好有所不同.有的鋪得較厚,這種情況CMC-Na不能太稀,不然硅膠嘩嘩的掉.厚的板展開的時(shí)候慢些,但是點(diǎn)樣量可以多一些不容易擴(kuò)散.薄的板展開比較快,容易擴(kuò)散點(diǎn)樣量宜少
5.薄層板的活化.活化一定要鋪好板干了以后放到烘箱活化.干了是指看不到有水痕在上面.一般可以選擇晚上鋪板,早上的時(shí)候正好薄層板已干,可放進(jìn)烘箱活化.為什么要完全干了才能活化? 如果未完全干會(huì)導(dǎo)致活化的時(shí)候薄層板硅膠開裂.
薄層板的制備總結(jié)個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)一：
手工鋪板是非常考驗(yàn)?zāi)愕哪土Φ氖虑椋詈檬钦覍?shí)驗(yàn)室的GGJJMMDD們一起，一來(lái)速度快，二來(lái)大家一起交流心得。
我認(rèn)為，第一個(gè)關(guān)鍵的地方，你的CMC-Na溶液必須配制的好，放置的也要很好，完全分層之后只能取上清液。上清液要澄清透明，時(shí)間太長(zhǎng)的CMC-Na可能會(huì)發(fā)黃，如果有霉菌出現(xiàn)的話，絕對(duì)不能使用。
第二就是硅膠和CMC- Na溶液的比例可以適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)，根據(jù)你所需要薄層板的軟硬來(lái)微調(diào)。可以一個(gè)人研磨，一個(gè)人緩慢的倒CMC-Na溶液。研磨時(shí)最能考驗(yàn)?zāi)愕亩Γ矣X得你該找女生來(lái)磨，但是那種太文弱的不行。
研磨時(shí)要順著一個(gè)方向，速度不宜快，要順著研缽的邊緣，觀察仔細(xì)，一定要把氣泡趕盡殺絕。研磨好的因改是均勻的，沒(méi)有氣泡，沒(méi)有固體的粉末類異物，溶液有一定的粘性。
最后，鋪板，我覺得是各人各喜歡，可以順著板中間倒，也可以順著某個(gè)邊緣倒，倒時(shí)也要注意不能引入小氣泡。可以用玻璃棒引著溶液平鋪在玻璃板上(順便說(shuō)一句，玻璃板應(yīng)該很干凈，沒(méi)有劃痕，沒(méi)有缺口，4個(gè)角要“健全”)，如有需要，可以雙手10個(gè)指頭拖住玻璃板，有節(jié)奏的顛，使得硅膠分?jǐn)倓蚍Q。
尤其是4個(gè)角，容易高出玻璃板其他部位，所以要格外注意。顛好的板，表面看上去要光滑平整，沒(méi)有氣孔。
鋪好的板，要找個(gè)干凈的地方放置晾干，這個(gè)過(guò)程也是耐心的等著它，請(qǐng)勿打擾!
自然晾干后，活化一下(105攝氏度40分鐘左右)，置于密封的干燥器保存。
最后想說(shuō)一下，如果你鋪板目的是座分析用的話，肯定得很仔細(xì)用心。如果僅是天然藥化那種粗略檢查過(guò)柱子得到的餾分純度，那就沒(méi)有必要這么復(fù)雜了，也就是說(shuō)速度可以快點(diǎn)，板的要求也沒(méi)有必要這么高!
自己多看看人家怎么鋪的，練練手，肯定就成高手了!
薄層板的制備總結(jié)個(gè)人經(jīng)驗(yàn)總結(jié)二：
(1)CMC-Na溶液煮了以后不能再用冷水兌，否則，幾天以后就會(huì)變綠，起霉。
(2)如果有抽濾裝置你可以直接把CMC-Na溶液濾過(guò)，就可以不必等它沉淀再取上清液了(嘿嘿，我是急性子)，還有兩個(gè)好處一是節(jié)省CMC-Na溶液，二是倒濾過(guò)的CMC-Na溶液的時(shí)候不必?fù)?dān)心會(huì)把下層的不溶物倒出來(lái)了!)
本人薄層層析 制板的工作經(jīng)驗(yàn)：
1. 配制4%～5%的羧甲基纖維素(CMC)：稱取CMC，溶于冷水中，邊加熱邊攪拌，直至成為清澈、透明的溶液。
2. 40%硅膠：按CMC溶液的量、按40%的比例稱取薄板層析硅膠，倒入大研缽中，與CMC溶液混合，充分研磨成均勻糊狀。
3. 加入幾滴乙醇或丁醇，可起到消泡的作用。
4. 將載玻片置于平臺(tái)上，用藥匙舀取糊狀硅膠，均勻地鋪在載玻片表面。
5. 自然干燥后，放入烘干箱烘12小時(shí)以上。再在105~110℃活化，活化時(shí)間為0.5~1小時(shí)，冷卻后即可使用。
我也來(lái)談一下自己的一點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)吧。CMC-Na：硅膠為2.5：1較好，樓上師兄說(shuō)的3：1應(yīng)該也可以，但是硅膠配的過(guò)稀時(shí)后果很嚴(yán)重，板子在晾干時(shí)會(huì)出現(xiàn)許多裂縫，象萬(wàn)壽菊樣的開花狀，完全不能用。
此乃本人的慘痛經(jīng)歷，當(dāng)時(shí)不知道是硅膠過(guò)稀的原因，還以為冬天太冷板子給凍裂了，又作了一批放在暖氣房，還是照裂不務(wù)。浪費(fèi)了整整一瓶GF254啊(做的是制備板用量較大)。
有個(gè)問(wèn)題至今不明白，請(qǐng)教各位大蝦，晾干的板子放在烘箱里怎么全炸裂了，有什么方法可以避免板子炸裂。
樓上的兄弟，我也有過(guò)同樣的遭遇。當(dāng)時(shí)板子鋪得太厚，后來(lái)加長(zhǎng)研磨的時(shí)間就好了。
首先我想說(shuō)的是手工鋪制的板子，只適宜于定性分析，不宜于分離定量。手工鋪板的要點(diǎn)我認(rèn)為有如下幾點(diǎn)：
1.手工鋪制的板子常用的有：硅膠G板和硅膠CMC板。前者是煅石膏(石膏經(jīng)140℃烘烤3—4小時(shí))與硅膠按1—1.3：10混合均勻。每份硅膠G加水2—3份調(diào)成糊狀，即可使用。后者的操作各位大蝦已有論述。
2.載板要求平滑清潔。在使用前一定要處理干凈，用洗滌液或肥皂水洗滌，再用水沖洗干凈，烘干;
3.CMC-Na要用蒸餾水為溶劑，加熱溶解后，放冷，最好濾過(guò)使用;消泡劑可直接與CMC-Na溶液混合使用;
4. 我在做時(shí)，先在研缽中加CMC溶液，再加硅膠，按同一方向研磨，這樣更容易調(diào)勻不易包埋硅膠顆粒;稠度以用研棒粘取，成連珠狀不成線狀下滴為好;配制時(shí)遵循現(xiàn)配現(xiàn)用、少量多次的原則，因其易干影響鋪制效果。
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