粗脂肪的定量（Soxhlet提取法）
一、目的：
學習索氏提取法測定粗脂肪含量的原理及方法。
二、原理：
所謂粗脂肪，是脂肪、游離脂肪酸、蠟、磷脂、固醇及色素等脂溶性物質的總稱。
索氏（soxhlet）脂肪提取器為一回餾裝置（圖2-1），由浸提管、小燒瓶及冷凝管三者連接而成。浸提管兩側分別有虹吸管及通氣管，盛有樣品的濾紙斗（包）放在浸提管內。溶劑（乙醚）盛于小燒瓶中，加熱后，溶劑蒸汽經通氣管至冷凝管，冷凝之溶劑滴入浸提管，浸提樣品。浸提管內溶劑愈積愈多，當液面達到一定高度，溶劑及溶于溶劑中的粗脂肪即經虹吸管流入小燒瓶。流入小燒瓶的溶劑由于受熱而氣化，氣體至冷凝管又冷凝而滴入浸提管內，如此反復提取回餾，即將樣品中的粗脂肪提盡并帶到小燒瓶中。最后，將小燒瓶中的溶劑蒸去，烘干，小燒瓶增加之重量，即樣品中粗脂肪含量。
三、器材及 試劑 ：
1．器材：
①麥麩以及其他動、植物材料。
②濾紙。 ③索氏提取器（一套）。
④分析天平。 ⑤恒溫水浴鍋
⑥干燥器。 ⑦鐵架臺。
⑧橡皮管。 ⑨萬能夾。
⑩干燥箱。 電吹風。
2． 試劑 ：
無水乙醚：市售無水乙醚往往仍有水分，需處理后使用，處理方法如下：
①含水較多的乙醚，可先于乙醚中投入無水氯化鈣（約為總體積1/3），1—2天后，過濾， 水浴 蒸餾，收集36℃餾出液。于此餾出液中加適量金屬鈉 ① （需用壓鈉機壓成鈉條或用刀切成薄片），1—2天后蒸餾，收集36℃餾出液，即得無水乙醚。
②水分較少的乙醚，可于每500g乙醚中加入30g—50g無水硫酸鈉或金屬鈉，1—2天后蒸餾，收集36℃餾出液。
四、操作步驟：
1．將洗凈的索氏提取器小燒瓶用鉛筆在磨口處編號，103—105℃烘2小時 ② ，取出，置干燥器內冷卻。分析天平稱重，并記錄之。
2．用分析天平稱取干樣約2g（準確至小數點后4位。樣品需研碎，通過40目篩孔），用濾紙包好 ③ ，放入浸提管內。
3．于已稱重的小燒瓶內倒入1/2—2/3 ④ 體積的無水乙醚。連接索氏提取器各部分，恒溫 水浴 鍋加熱回餾2—4小時（樣品含脂量高的，應適當延長時間） ⑤ 。控制水浴溫度，每小時回餾3—5次較宜 ⑥ 。
4．提取完畢，待乙醚完全流入小燒瓶時，取出濾紙包，再回餾一次以洗滌浸提管。繼續加熱，待浸提管內乙醚液面接近虹吸管上端而未流入小燒瓶前，倒出浸提管中之乙醚。如果小燒瓶中尚留有乙醚，則繼續加熱蒸發，直到小燒瓶中溶劑基本蒸盡，停止加熱，取下小燒瓶，用吹風機將瓶中殘留乙醚吹盡 ⑦ ，再置103—105℃烘箱中烘半小時，取出置干燥器中冷至室溫，稱重，由小燒瓶增加之重量可計算出樣品的脂肪含量。
按同法，用不包樣品的濾紙包做空白測定。
測定脂肪后，小燒瓶需先用2%氫氧化鈉酒精浸泡，再用肥皂洗凈烘干保存。
注意：進行本實驗時應切實注意防火，乙醚為易燃品，切忌明火加熱，同時要注意提取器各連接處是否漏氣，以及冷凝管冷凝效果是否良好，以免大量乙醚蒸氣外逸。
附：水 分 測 定
取扁形稱量瓶 ⑧ 2只，洗凈，用鉛筆在磨口處作好記號，置103—105℃烘箱中烘2小時，移入干燥器內，冷至室溫（約10—15分鐘），稱重（準確于小數點后第4位，下同）。用稱過重量的稱量瓶，各稱取粉碎樣品（麥麩）2g，同時于103—105℃烘2小時，取出置干燥器中冷卻，稱重。如此重復烘烤，直至恒重 ⑨ ，按下式計算樣品的含水量。
注意：
1．烘烤樣品時，必須將稱量瓶蓋子打開，斜擱在稱量瓶口上，以免水分不能蒸發，但也不必將蓋子取下，否則容易弄臟弄錯。
2．冷卻和稱重時，應將稱量瓶蓋子蓋好，稱重要迅速，干燥器中的吸水劑需新鮮，否則將因樣品吸收水分，甚至重量反而增加。
3、在整個操作過程中，應保持稱量瓶清潔，不能用手直接拿取。
① 金屬鈉遇水爆炸，應注意。不能用手直接拿取！用后之金屬鈉條（片），可用二甲苯洗去外層黃色物質，再浸入煤油中并貯于密封容器。
② 空索氏提取器小燒瓶（以及空稱量瓶）經103—105℃烘烤2小時即恒重。
③ 濾紙包必須用絲線扎好，保證樣品不漏散，最好用特制的濾紙斗，斗口塞以脫脂棉。樣品包（斗）放入浸提管后，其高度不能超過乙醚面的最高高度。
④ 裝入乙醚之量，應以在回餾過程中小燒瓶內有適量乙醚存在為準，如發現小燒瓶中脂肪顏色變深（似燒焦狀），系溶劑太少或溫度太高。
⑤用水浴鍋加熱，但所用之水需清潔（用 蒸餾 水），提取完畢后，如小燒瓶外部沾有污漬，應洗刷干凈，再烘烤稱重。
⑥ 回餾速度不宜太快，否則樣品中脂肪不易浸提完全。太慢則時間不經濟。至于提取時間的多寡，與樣品用量、脂肪含量及顆粒大小有關，本實驗所用樣品量及提取時間僅適于測定麥麩。
⑦ 必須將小燒瓶中殘留之少量乙醚在通風處趕盡，然后再放入 烘箱 ，否則易發生事故。
⑧ 如用高型 稱量瓶 ，樣品水分不易烤干應經常翻拌樣品，為此可置一小玻棒于瓶內，一并烘烤與稱重。用扁型 稱量瓶 時，樣品也應薄薄地平鋪于瓶底，不宜過多。
⑨ 衡量是否恒重的標準，應根據各個實驗的有效數字而定，本實驗以前后兩次重量之差不超過10mg，即可。
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