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單層培養(yǎng)細胞的透化材料與儀器細胞培養(yǎng)物HEPES培養(yǎng)基步驟1.約在實驗開始前1小時，將細胞培養(yǎng)物換上含有預熱（37℃）的20mmol/LHEPES（pH7.2）的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。讓細胞在實驗前與新培養(yǎng)基達成平衡。2....

測定[γ-32P]ATP的比活性步驟準備下列材料：含有未知濃度mp]ATP的細胞裂解物樣品10mg/ml激酶底物肽漸夜（Calbiochem)0.5mraol/LcAMP溶液I、Calbiochem)cA-PrK(Calbiochem)cA-PrK分析緩沖液lmol...

從標記的細胞或者細胞裂解物中提取ATP步驟1.從標記細胞提取ATP1)備下列材料：本實驗用到的所有溶液必須用Mlli-Q純化的水或它的等價物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p標記的細胞帶螺...

活細胞表面抗原的熒光染色（間接免疫熒光）材料與儀器細胞PBS溶液疊氮化鈉步驟1.在培養(yǎng)皿中加入1mmol/LEDTA/1mmol/LEGTA的PBS溶液，收獲細胞。此程序比通常的胰蛋白酶消化時間長。4℃1000g離心5分鐘...

活細胞表面抗原的熒光染色（直接免疫熒光）材料與儀器細胞初始抗體PBS溶液疊氮化鈉步驟1.在培養(yǎng)皿中加入1mmol/LEDTA/1mmol/LEGTA的PBS溶液，輕搖，收獲細胞。4℃1000g離心5分鐘。2.用4mlPBS+0.1%...

非固定細胞的無洗染色材料與儀器細胞蛋白酶NST-DAPI緩沖液MFM檸檬酸緩沖液DNA染色裂解溶液尼龍篩步驟一、組織培養(yǎng)細胞的染色1.通過對懸浮培養(yǎng)中的細胞傾析或對單層培養(yǎng)的細胞蛋白酶消化來收獲細胞。計數(shù)...

固定全細胞的PI染色材料與儀器細胞PBS冷乙醇PI溶液錐形管步驟1.分離細胞并移至15ml的錐形管中。檢查有單個細胞懸浮，1000g離心5分鐘，棄上清。2.用不含Ca或Mg的PBS將細胞洗2次，計數(shù)細胞總數(shù)，記在管山。...

Caspase激活的比色計定量材料與儀器細胞PBSEppendorfDMSO微量滴定板步驟1.250g離心5分鐘收集2X106~5X106細胞，用pH7.2的冷PBS洗1次，用200μl溶解緩沖液重懸。2.在冰上孵育細胞30分鐘。3.用Eppendor...