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微載體原理以高濃度接種細(xì)胞和微珠，然后按照要求進(jìn)行稀釋、攪拌和取樣。材料與儀器起始培養(yǎng)物生長培養(yǎng)基微載體攪拌培養(yǎng)瓶磁力攪拌器步驟1.按照所需最終培養(yǎng)液量的1/3，以2~3g/L混懸微珠。2.用胰蛋白酶消化和計(jì)數(shù)細(xì)...

方案27.12脂質(zhì)體介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染材料與儀器L8057-Y10細(xì)胞D-PBSA培養(yǎng)瓶培養(yǎng)板F12FB培養(yǎng)基G418(Invitrogen)選擇性培養(yǎng)基電穿孔電穿孔專用杯電穿孔儀II電穿孔儀-II配套的效能擴(kuò)增器-Plus步驟表達(dá)載體與...

懸浮細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的接種原理淋巴樣細(xì)胞通常呈懸浮狀生長。常用的培養(yǎng)液為含10%~15%FBS的RPMI1640各種細(xì)胞系間最佳接種密度和平臺(tái)期細(xì)胞密度各不相同。當(dāng)培養(yǎng)一種新的細(xì)胞系時(shí)其最佳原則為按1:2和1:4的比...

單層細(xì)胞在細(xì)胞瓶中的接種原理單層生長的細(xì)胞增殖，融合成片，并長滿細(xì)胞瓶表面。有些細(xì)胞靠頻繁地?fù)Q液可維持細(xì)胞在平臺(tái)期數(shù)天至數(shù)周；而許多其他細(xì)胞系需要胰蛋白酶處理、傳代培養(yǎng)后才能存活下來，用胰蛋酶處理可將...

血清檢測原理不同批次的血清支持細(xì)胞生長的能力也不同，尤其是對(duì)克隆細(xì)胞的生長。檢測不同批次的血淸，然后大批量購買血清不僅能節(jié)約經(jīng)費(fèi)且能減少實(shí)驗(yàn)條件引起的差異，某些批次血清可能含有毒性或抑制生長的化合物。...

單層細(xì)胞的胰蛋白酶處理原理下述方案描述的是釆用胰蛋白酶處理細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞的傳代或收集。維持細(xì)胞系的方法通常為每周傳代一次，在傳代的前一天換培養(yǎng)液；但是某些細(xì)胞系需要更頻繁的傳代。每種細(xì)胞系應(yīng)單獨(dú)傳代以...

血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)法原理血細(xì)胞計(jì)數(shù)器含有2個(gè)室，每個(gè)室充滿并蓋上蓋玻片后總體積為9x10-3ml,每室有9個(gè)大方格，因此蓋上蓋玻片后每個(gè)大方格的容積為0.1mm3或1.0x10-4ml，對(duì)計(jì)數(shù)來講，9個(gè)大方格再進(jìn)行分隔沒有必要，可...

凍存細(xì)胞的復(fù)蘇原理凍存細(xì)胞應(yīng)在流水中快速融化并加入生長培養(yǎng)液。實(shí)驗(yàn)者應(yīng)配戴護(hù)目鏡和手套，因?yàn)樵]在液氮中的凍存管中可能漏人液氮，而當(dāng)融化凍存液時(shí)凍存管中的氣體溫度上升可導(dǎo)致爆炸。材料與儀器凍存細(xì)胞乙...